[发明专利]一种普卡那肽的片段合成方法

权利要求书

1.一种普卡那肽的片段合成方法，其特征在于，主要包括以下步骤：

(1)在Fmoc-Leu-树脂上，按照普卡那肽肽序采用固相合成方法得到线性普卡那肽树脂；其中，S5-S8采用四肽片段，其余采用相应的保护氨基酸或片段；

(2)将步骤(1)得到的线性普卡那肽树脂裂解，得到线性普卡那肽；

(3)将步骤(2)得到的线性普卡那肽经环化，得普卡那肽粗肽。

2.根据权利要求1所述的普卡那肽的片段合成方法，其特征在于：所述步骤(1)得到的线性普卡那肽树脂为：R₁-Asn(R₂)-Asp(OtBu)-Glu(OtBu)-Cys(R₃)-Glu(OtBu)-Leu-Cys(R₄)-Val-Asn(Trt)-Val-Ala-Cys(R₃)-Thr(tBu)-Gly-Cys(R₄)-Leu-树脂；

其中：

R₁选自Boc、Fmoc、Z；

R₂选自Trt、H；

R₃和R₄选自Trt、Acm、StBu或tBu，且R₃与R₄不同。

3.根据权利要求1所述的普卡那肽的片段合成方法，其特征在于：所述步骤(1)S5-S8采用的四肽片段为Fmoc-Glu(OtBu)-Leu-Cys(R₄)-Val-OH；

其中，R₄选自Trt、Acm。

4.根据权利要求1所述的普卡那肽的片段合成方法，其特征在于：所述步骤(1)其余采用的相应片段包括S1-S2或S1-S4。

5.根据权利要求4所述的普卡那肽的片段合成方法，其特征在于：所述S1-S2片段为R₁-Asn(R₂)-Asp(OtBu)-OH，S1-S4片段为R₁-Asn(R₂)-Asp(OtBu)-Glu(OtBu)-Cys(R₃)-OH；

其中：

R₁选自Fmoc、Boc；

R₃选自Trt、Acm。

6.根据权利要求1所述的普卡那肽的片段合成方法，其特征在于：所述步骤(1)中树脂选自Wang树脂或2-氯三苯甲基氯树脂。

7.根据权利要求1所述的普卡那肽的片段合成方法，其特征在于：所述步骤(1)Fmoc-Leu-树脂替代度范围为0.2-0.5mmol/g。

8.根据权利要求1所述的普卡那肽的片段合成方法，其特征在于：所述步骤(2)裂解步骤中裂解试剂选自三氟乙酸与其他组份，其他组份选自水、苯酚、3-巯基丙酸、三异丙基硅烷，其中三氟乙酸占90％以上，其它组份各占1％-5％。

9.根据权利要求1所述的普卡那肽的片段合成方法，其特征在于：所述步骤(3)得到的普卡那肽粗肽可进一步经反相高效液相色谱纯化、冻干得到普卡那肽精肽。