[发明专利]分离的多肽、核酸及其应用

说明书

本发明提出了一种分离的多肽，该多肽与野生型肌肽合成酶SEQ ID NO:1相比，所述多肽具有310位氨基酸突变。利用本发明提供的多肽可以高效制备肌肽，并且绿色环保，适于大规模生产。

技术领域

本发明涉及生物化学领域，具体地，涉及分离的多肽、核酸及其应用，更具体地，涉及分离的多肽、核酸、构建体、重组细胞、提高肌肽合成酶活性的方法和制备肌肽的方法。

背景技术

L-肌肽(β-丙氨酰-L-组氨酸)是由β-丙氨酸和组氨酸组成的二肽，在脊椎动物的骨骼肌和中枢神经系统中具有较高浓度(Boldyrev，2013)。L-肌肽在体内具有许多重要的生理功能，包括抗氧化，抗糖化以及细胞质间缓冲作用和消除自由基等。因此L-肌肽作为一种具有生物活性化合物而备受关注，并广泛用于医药，化妆品，食品添加剂等领域(Yin etal.2019)。利用化学合成法生产L-肌肽的研究已被广泛报道，是目前工业生产的主要方法。化学合成法工艺复杂，会产生许多有毒物质，并且反应条件苛刻，能耗大，不符合绿色化学的要求。

因此有必要开发新的方法予以取代。

发明内容

本发明旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。

在本发明的第一方面，本发明提出了一种分离的多肽。根据本发明的实施例，与野生型肌肽合成酶SEQ ID NO:1相比，所述多肽具有310位氨基酸突变。发明人经过大量的研究发现，对野生型肌肽合成酶的310位氨基酸进行突变可以改变肌肽合成酶的活性，突变的氨基酸类型不同，对酶活性的影响不同，例如，有些类型的氨基酸可以大幅降低酶活，有些可以使酶失去催化肌肽合成的活性，有些可以大幅提高酶活，进而提高合成肌肽的转化率。

根据本发明的实施例，上述分离的多肽还具有下列附加技术特征：

根据本发明的实施例，与野生型肌肽合成酶SEQ ID NO:1相比，所述多肽具有p.Gly310Ala或p.Gly310Ser。发明人经过大量的研究发现，野生型肌肽合成酶的310位氨基酸由甘氨酸突变为丙氨酸时，可以大幅提高肌肽合成酶的活性，可以将酶活提高26％；野生型肌肽合成酶的310位氨基酸由甘氨酸突变为丙氨酸时丝氨酸时，也可以提高肌肽合成酶的活性。

根据本发明的实施例，所述多肽具有SEQ ID NO:2或3所示的氨基酸序列或者与SEQ ID NO:2或3所示的氨基酸序列相比具有至少95％同一性的氨基酸序列。

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