[发明专利]检测常见呼吸道病毒的引物组合及方法在审
申请号: | 202110558576.X | 申请日: | 2021-05-21 |
公开(公告)号: | CN113186348A | 公开(公告)日: | 2021-07-30 |
发明(设计)人: | 韩凤章;李雪多 | 申请(专利权)人: | 广东科蓝生物技术有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6869;C12Q1/686;C12N15/11 |
代理公司: | 广州广典知识产权代理事务所(普通合伙) 44365 | 代理人: | 万志香 |
地址: | 524033 广东省湛江市赤坎区广田路18号*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 常见 呼吸道 病毒 引物 组合 方法 | ||
本发明公开了一种检测常见呼吸道病毒的引物组合及方法,所述引物组合包括针对15种常见呼吸道病毒检测的12对引物中的两对或以上。本发明的检测方法是对捕获得到的待检测样本的序列进行高通量测序,并结合生物信息学分析方法,与15种常见呼吸道病毒特定区域核酸的特征序列进行比对,可以非常准确地判断待检测样本的序列是否与常见的15种病毒相匹配,具有准确性高,通量高等优势。
技术领域
本发明属于基因检测技术领域,更具体地,本发明涉及一种检测常见15种 呼吸道病毒的引物组合及方法。
背景技术
呼吸道病毒,是指主要侵入呼吸道,在呼吸道粘膜上皮细胞增殖,引起呼 吸道局部感染或呼吸道以外组织器官病变的病毒,包括常见的流感病毒,人偏 肺病毒,合胞病毒,副流感病毒,冠状病毒等。据统计,临床上约90%~95%的 急性呼吸道感染由这类呼吸道病毒引起。
近年来新的致病性呼吸道病毒还在不断地被发现,如偏肺病毒、冠状病毒、 博卡病毒等,给人类的健康构成很大的威胁。急性呼吸道感染大多具有潜伏期 短、发病急、感染力强、传播快等特点,常可导致较高的发病率和死亡率,尤 其受到环境变化和生态平衡破坏的影响,病毒易发生各种变异,常突然暴发, 病情凶险,死亡率也较高。但是呼吸道病毒引起的感染症状往往比较相似,难 以靠临床症状及常规检测方法进行明确诊断。
目前检测呼吸道病毒通常采用的方法为荧光定量PCR等,这些方法都没办 法获得病毒的序列,如果病毒发生几个碱基的突变,可能会导致荧光信号消失 等漏检的情况。因此,迫切需要一种灵敏度更高、特异性更强、检测范围更广 的方法进行检测,从而可以很好地区分各种呼吸道病毒。
发明内容
基于此,本发明提供了一种检测常见呼吸道病毒的引物组合,所述引物组 合最多可以一次性地检测出常见的15种呼吸道病毒。
实现上述发明目的的具体技术方案如下:
一种检测常见呼吸道病毒的引物组合,所述引物组合包括针对流感A病毒 检测的引物对SEQ ID No.1~2、针对流感B病毒检测的引物对SEQ ID No.3~4、 针对人鼻病毒检测的引物对SEQ ID No.5~6、针对人偏肺病毒检测的引物对SEQ ID No.7~8、针对副流感病毒1型检测的引物对SEQ ID No.9~10、针对副流感病 毒2型检测的引物对SEQ ID No.11~12、针对副流感病毒3型检测的引物对SEQ ID No.13~14、针对副流感病毒4型检测的引物对SEQ ID No.15~16、针对OC43 型冠状病毒和229E型冠状病毒检测的引物对SEQ IDNo.17~18、针对HKU1型 冠状病毒和NL63型冠状病毒检测的引物对SEQ ID No.19~20,针对合胞病毒A 型和B型检测的引物对SEQ ID No.21~22、以及针对2019ncov新型冠状病毒检 测的引物对SEQ ID No.23~24中的两对或以上。
在其中一些实施例中,所述引物组合的工作浓度为10nM-10uM。
在其中一些实施例中,所述引物组合的工作浓度为100nM-10uM。
本发明的另一目的是提供一种常见呼吸道病毒的检测方法,该检测方法具 有灵敏度高、特异性强、通量高的特点。
实现上述发明目的的具体技术方案如下:
一种常见呼吸道病毒的检测方法,包括以下步骤:
(1)、将检测常见呼吸道病毒的12对引物中的两对或以上混合,制成混合引 物;所述混合引物的工作浓度为10nM-10uM;
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