[发明专利]一种烟草多分枝、矮化基因及其应用在审
申请号: | 202110548883.X | 申请日: | 2021-05-20 |
公开(公告)号: | CN115386585A | 公开(公告)日: | 2022-11-25 |
发明(设计)人: | 王大伟;孙玉合;刘贯山;王晓;吴新儒 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院烟草研究所(中国烟草总公司青州烟草研究所) |
主分类号: | C12N15/54 | 分类号: | C12N15/54;C12N9/10;C12N15/84;A01H6/82;A01H5/00;C12Q1/6895;C12Q1/6869 |
代理公司: | 山东济南齐鲁科技专利事务所有限公司 37108 | 代理人: | 赵明媚 |
地址: | 266000 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 烟草 分枝 矮化 基因 及其 应用 | ||
1.一种烟草多分枝、矮化基因,其特征在于,其序列具有:
(1)SEQ ID NO:1或2中的任何一个核苷酸序列或者其互补序列;
(2)与(1)的核苷酸序列具有至少95%、尤其是至少96%或98%或99%序列同一性的核苷酸序列;
(3)与(1)或(2)的核苷酸序列的互补序列在中等严格条件、优选高严格杂交条件下杂交的核苷酸序列。
2.一种重组载体,其特征在于,包含权利要求1所述的基因的多核苷酸序列,所述重组载体是克隆载体或者用于表达所述多核苷酸的表达载体。
3.一种重组宿主细胞,其特征在于,包含权利要求1所述的烟草多分枝、矮化基因的多核苷酸序列或权利要求2所述的重组载体,或它的基因组中整合有权利要求1所述的烟草多分枝、矮化基因的多核苷酸序列。
4.根据权利要求3所述的重组宿主细胞,其特征在于,所述细胞为大肠杆菌或农杆菌细胞。
5.一种培育少分枝、农业高效烟草品种的方法,其特征在于,所述方法为:通过防止或抑制烟草中权利要求1所述的烟草多分枝、矮化基因的表达,或者对该基因进行敲除,获得烟草NtMAB4基因的沉默或敲除植株。
6.所述烟草多分枝、矮化基因在培育少分枝、农业高效烟草品种中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述应用包括:
(1)通过RNA沉默技术,对权利要求1所述的烟草多分枝、矮化基因的核苷酸序列进行基因工程操作,抑制沉默其表达,从而培育出少分枝、农业高效烟草新品种;
或(2)通过基因编辑技术,对权利要求1所述的烟草多分枝、矮化基因的靶标核苷酸序列进行基因编辑,敲除阻断其表达,从而培育出少分枝、农业高效烟草新品种;
或(3)通过TILLING技术,对权利要求1所述的烟草多分枝、矮化基因的序列片段筛选EMS突变体库,获得其表达终止突变体,从而培育出少分枝、农业高效烟草新品种;
或(4)通过PCR技术,对权利要求1所述的烟草多分枝、矮化基因的序列片段筛选片段缺失突变体库,获得其缺失突变体,从而培育出少分枝、农业高效烟草新品种。
8.一种鉴定烟草多分枝、矮化基因的特异引物对,其特征在于,所述特异引物对包括序列依次分别如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示的NtMAB4S1-F1和NtMAB4S1-R1、以及序列依次分别如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示的NtMAB4T1-F1和NtMAB4T1-R1。
9.一种烟草多分枝、矮化基因的鉴定方法,其特征在于,包括以下步骤:以提取的待鉴定烟草的基因组为模板,以权利要求8所述的特异引物对作为引物进行PCR扩增,对扩增产物进行电泳检测,并对扩增产物进行测序,将测序结果与烟草多分枝、矮化基因的序列比对,即可得到鉴定结果。
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