[发明专利]用于快速定性分型检测四类人副流感病毒的实时荧光定量PCR探针引物组及试剂盒

说明书

本发明公开了一种用于快速定性分型检测四类人副流感病毒的实时荧光定量PCR探针引物组及试剂盒，该试剂盒包括针对HPIV‑1、HPIV‑2，HPIV‑3和HPIV‑4四类副流感病毒专门设计的探针引物组，所述探针引物组中引物序列如SEQ ID NO.1‑27所示，所述探针引物组中探针序列如SEQ ID NO.28‑38所示。本发明用于快速定性分型检测四类人副流感病毒的实时荧光定量PCR试剂盒的反应体系瞄准于四类人副流感病毒基因组的保守区域，可用于快速检测鼻咽拭子或痰液样本中的副流感病毒，检测结果可用于辅助诊断由副流感造成的咳嗽，发热和肺炎等症状，快速的将副流感患者和其他发热肺炎患者中区分开来。

技术领域

本发明涉及生物检测技术领域，具体来说，涉及一种用于快速定性分型检测四类人副流感病毒的实时荧光定量PCR探针引物组及试剂盒。

背景技术

人副流感病毒(human parainfluenza virus，HPIV)是一组可引起上呼吸道和下呼吸道感染的病毒，共分为四个类别：HPIV-1、HPIV-2、HPIV-3和HPIV-4(4型副流感有4a和4b两个亚型)。HPIVs属于副粘病毒科(Paramyxoviridae family)，形态为有包膜的RNA病毒。HPIVs通常会引起婴儿、幼儿、老年人和免疫系统薄弱的人上呼吸道和下呼吸道疾病，但任何人都可能被感染。被感染后，大约需要2到7天的时间才会出现症状。HPIV-1和HPIV-2都会引起咳嗽，其中HPIV-1是最常见的导致婴幼儿感冒的病毒之一，两者都会引起上呼吸道和下呼吸道疾病，以及感冒症状。HPIV-3更常与毛细支气管炎、支气管炎和肺炎有关。HPIV-4的感染频率较低，但可能会导致轻度到严重的呼吸道疾病。

上呼吸道疾病的症状可能包括高热、流鼻涕、咳嗽，下呼吸道疾病的症状可能包括喉咙(声带(喉)、气管和支气管感染)、支气管炎(连接气管和肺部的主要气道感染)、毛细支气管炎(肺部最小气道感染)、肺炎(肺部感染)。HPIV疾病的其他症状可能包括：喉咙痛、打喷嚏、喘息、耳朵痛、易怒、食欲下降。

HPIVs可以通过咳嗽或打喷嚏等方式从感染者传播给健康人。密切的个人接触，如触摸或握手，或者触摸带有HPIV的物体或表面，然后再触摸嘴、鼻子或眼睛等黏膜也可以被感染。

HPIV的四种类型有不同的流行病学特征，并且在一年中的不同时间循环。根据美国流行病学的研究显示：引起儿童咳嗽的HPIV-1通常在奇数年的秋天会有较多的病例。可以引起咽喉炎的HPIV-2在每年的秋季更为常见。其感染频率比HPIV-1和HPIV-3较低。HPIV-3感染通常发生在每年春季和初夏的几个月。然而，HPIV-3感染可能全年都会发生，特别是当HPIV-1和HPIV-2不是季节性的时候。HPIV-4(4a和4b亚型)的季节性模式目前没有得到很好的描述。

目前没有一个较为准确的副流感患病人数，但很多研究者认为每年副流感患者的人数相当之高。副流感在每年的秋季和冬季较为常见，症状在婴儿中最为严重，随着年龄增长其症状逐渐温和。学龄儿童大多数都已经有过副流感病毒的接触史，在成人群体中大部分人已经有了对副流感的抗体。但是，反复感染副流感病毒可能导致严重的下呼吸道疾病，如肺炎、支气管炎和毛细支气管炎。老年人和免疫系统受损的人患严重感染的风险更高。

副流感病毒的诊断方法有：使用聚合酶链反应(PCR)直接检测病毒基因组；使用免疫荧光法或酶免疫法直接检测呼吸道分泌物中的病毒抗原(在症状出现后1周内收集)；细胞培养中病毒的分离与鉴定；血清样本中HPIV特异性的IgG抗体水平显著升高。现有技术中还未见用于快速定性分型检测四类人副流感病毒的实时荧光定量PCR试剂盒。

发明内容

针对相关技术中的上述技术问题，本发明提出一种用于快速定性分型检测四类人副流感病毒的实时荧光定量PCR探针引物组及试剂盒，能够克服现有技术的上述不足。

为实现上述技术目的，本发明的技术方案是这样实现的：