[发明专利]一种KCNQ1基因检测试剂盒及检测方法

说明书

本发明公开了一种KCNQ1基因检测试剂盒及检测方法，检测方法包括以下步骤：A、DNA提取；B、基因组DNA进行质检；C、构建扩增子靶向捕获文库；D、对制备好的文库进行上机测序；E、对数据结果进行标准分析；F、数据质控；G、变异检测结果，本发明覆盖了KCNQ1基因全编码区、编码区前后50bp及chr11：2482918、chr11：2484803、chr11：2466289等位点；同时可进行多对特异性引物的扩增，相比传统的一代测序技术降低了操作的复杂度，在保持与二代测序技术相同测序深度的同时又降低了成本。

技术领域

本发明涉及基因检测技术领域，具体为一种KCNQ1基因检测试剂盒及检测方法。

背景技术

心源性猝死是指急性症状发作后1小时内发生的以意识突然丧失为特征的由心脏原因引起的自然死亡，占猝死的大部分，死者生前可有也可无心血管疾病。心源性猝死具有起病急、进展快、病死率高等特点。全球每年有1700万人因心血管疾病而死亡，心源性猝死占了25％左右。女性的心源性猝死发生率为1.40/1000人/年，男性为6.68/1000人/年。约50％的心脏骤停发生在无已知的心脏病个体中，但大部分患者有未诊断的缺血性心脏病。据估计，我国每年心源性猝死的人超过50万，且愈趋年轻化。心源性猝死者绝大多数患有器质性心脏病，主要包括冠心病、肥厚型和扩张型心肌病、心脏瓣膜病、心肌炎、非粥样硬化性冠状动脉异常、浸润性病变、传导异常(QT间期延长综合征、心脏阻滞)和严重室性心律失常等。另外，洋地黄和奎尼丁等药物中毒亦可引起。大多数心脏性猝死则是室性快速心律失常所致。一些暂时的功能性因素，如心电不稳定、血小板聚集、冠状动脉痉挛、心肌缺血及缺血后再灌注等使原有稳定的心脏结构异常发生不稳定情况。某些因素如自主神经系统不稳定、电解质失调、过度劳累、情绪压抑及用致室性心律失常的药物等，都可触发心源性猝死。心源性猝死遇难者一级亲属的家庭筛查是一项非常重要的干预措施，它不仅可以识别有风险的家属，对可用的治疗作出建议，还可以充分预防猝死。在高达50％心律失常性猝死综合征遇难者的亲属中，可作出遗传性致心律失常性疾病的诊断。

长QT综合征(long QT syndrome,LQTS)是一种家族遗传性电活动紊乱心脏病。QT间期是指心电图上QRS波群起点至T波终点的总时限，代表了心室除极及复极的总时间，是电兴奋在心室传导的反映。LQTS的临床表现主要为尖端扭转性室性心动过速引起的反复晕厥和猝死。大多数病人的症状发生在运动、情绪紧张、激动时，晕厥一般持续1-2min，少部分病人的猝死发生在睡眠时。心电图是诊断LQTS的重要依据，大部分患者心电图上QT间期延长(男性≥470ms，女性≥480ms)，但也有少部分患者QT间期可正常，称之为“QT间期正常”或“隐匿型”LQTS。LQTS是最早发现的离子通道病，致病基因及突变位点也相应较多，涉及Na+通道、K+通道、Ca2+通道及某些亚单位，甚至是对离子通道起调控作用的蛋白。针对以下情况，专家推荐进行LQTS的相关基因检测：基于病史、家族史及心电图表型被心脏专家高度怀疑LQTS的患者；无症状的特发QT间期延长者；排除继发性QT间期延长因素的患者。

KCNQ1(Potassium voltage-gated channel,KQT-like subfamily,member 1)为缓慢型延迟整流钾离子流通道的α亚基基因,编码缓慢型延迟整流钾离子流通道(Isk)的α亚基,其与KCNE1基因编码的β亚单位-mink蛋白共同组成完整的缓慢激活延迟整流钾通道(Iks),参与动作电位2相平台期的终止和3相复极过程，是心肌复极过程中的关键电流。该基因多态性导致通道蛋白功能缺陷，复极延迟,动作电位时程延长，心电图表现为QT间期延长,尖端扭转型室性心动过速(torsade de pointes，TdP)或心室颤动，增加了心源性猝死的易感性。