[发明专利]鸟苷酸环化酶C的超纯激动剂、制备和使用所述激动剂的方法

权利要求书

1. 纯化的肽，其包含选自SEQ ID NO: 1、9和104的GCC激动剂序列，其中所述纯化的肽具有以下特征：

a) 具有不大于0.1 g/mL的堆积密度；

b) 包含少于50 ppm乙酰胺；和

d) 少于0.3% α-Asp-9-plenacanatide (RRT 1.33)。

2.权利要求1的纯化的肽，其中所述肽在25℃下稳定至少3个月。

3. 权利要求1的纯化的肽，其中所述肽具有特征为以下的粒径分布：

当用液体分散剂通过光散射测量时

a) D10值为约2 -15 µm；

b) D50值为约15-50 µm；和

c) D90值为约40-80 µm。

4. 权利要求1的纯化的肽，其中所述肽具有不大于0.06 g/mL、不大于0.05 g/mL或不大于0.04 g/mL的堆积密度。

5.权利要求1或2的纯化的肽，其中所述肽具有不少于95%、不少于96%或不少于97%的色谱纯度。

6.权利要求1-5中任一项的纯化的肽，其中所述肽基本上不含水。

7.权利要求6的纯化的肽，其中所述水不大于10%、不大于9%、不大于8%、不大于7%、不大于6%或不大于5%。

8.权利要求1-7中任一项的纯化的肽，其中所述肽还基本上不含选自乙腈、醇、铵、乙酸盐和TFA的一种或多种杂质。

9. 权利要求8的纯化的肽，其中所述肽包含少于300 ppm乙腈。

10. 权利要求8或9的纯化的肽，其中所述肽包含少于0.1% TFA。

11. 权利要求8-10中任一项的纯化的肽，其中所述肽包含少于1000 ppm异丙醇。

12. 权利要求8-11中任一项的纯化的肽，其中所述肽包含少于600 ppm异丙醇。

13. 权利要求8-12中任一项的纯化的肽，其中所述肽包含少于0.25 %乙酸盐。

14.权利要求1-13中任一项的纯化的肽，其中所述肽还基本上不含拓扑异构体。

15. 权利要求1-14中任一项的纯化的肽，其中所述肽还基本上不含异-Asp2-plecanatide (RTT 0.96-0.97)。

16. 纯化包含选自SEQ ID NO: 1-251的GCC激动剂序列的肽的方法，所述方法包括：

提供包含肽、水和乙腈的第一肽溶液，所述肽包含选自SEQ ID NO: 1-251的GCC激动剂序列；

用所述第一肽溶液上样C18或聚合物吸附柱，以将所述肽吸附至C19或聚合物吸附柱；

用醇的水溶液将所述肽从C18或聚合物吸附柱洗脱，形成第二肽溶液；

减少在第二肽溶液中的醇的量；和

冻干第二肽溶液，使得获得干燥的肽。

17.权利要求16的方法，其中所述醇的水溶液包含异丙醇。

18.权利要求17的方法，其中在醇的水溶液中异丙醇含量为约40%。

19.权利要求16的方法，其中第一肽溶液还包含乙酰胺。

20.权利要求16的方法，其中第一肽溶液还包含0.2%乙酸或1%磷酸三乙胺。