[发明专利]一种化学培养体系及其应用有效
| 申请号: | 202110489193.1 | 申请日: | 2021-04-30 |
| 公开(公告)号: | CN112980792B | 公开(公告)日: | 2022-06-21 |
| 发明(设计)人: | 魏君;蔡萌 | 申请(专利权)人: | 武汉睿健医药科技有限公司 |
| 主分类号: | C12N5/079 | 分类号: | C12N5/079;C12N5/0797;C12N5/0793;C12N5/10 |
| 代理公司: | 武汉天领众智专利代理事务所(普通合伙) 42300 | 代理人: | 杨建军 |
| 地址: | 430000 湖北省武汉市东湖新技术*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 化学 培养 体系 及其 应用 | ||
1.一种化学培养体系,其特征在于,包括基础培养基和添加剂;所述添加剂包括小分子化合物,所述小分子化合物为:
哌啶醇氧化物和木犀草素;或,
哌啶醇氧化物、木犀草素中的至少一种以及D(+)-半乳糖、重组人转铁蛋白中的至少一种;
所述哌啶醇氧化物的用量为10uM-200uM;
所述木犀草素的用量为5uM-150uM;
所述D(+)-半乳糖的用量为5-25ug/ml;
所述重组人转铁蛋白的用量为50-200ng/ml。
2.根据权利要求1所述的化学培养体系,其特征在于,所述小分子化合物为哌啶醇氧化物、木犀草素、D(+)-半乳糖、重组人转铁蛋白。
3.根据权利要求1所述的化学培养体系,其特征在于,所述哌啶醇氧化物的用量为10uM、20uM、50uM、100uM、150uM或200uM。
4.根据权利要求1所述的化学培养体系,其特征在于,所述木犀草素的用量为5uM、10uM、50uM、75uM、100uM或150uM。
5.根据权利要求1所述的化学培养体系,其特征在于,所述D(+)-半乳糖的用量为5.5ug/ml、7.5ug/ml、10 ug/ml、12.5 ug/ml、15 ug/ml、17.5 ug/ml、20 ug/ml、22.5ug/ml或25ug/ml。
6.根据权利要求1所述的化学培养体系,其特征在于,所述重组人转铁蛋白的用量为55ng/ml、75ng/ml、100ng/ml、125 ng/ml、150ng/ml、175 ng/ml或200ng/ml。
7.根据权利要求1所述的化学培养体系,其特征在于,其中,所述基础培养基为DMEM培养基或DMEM-F12培养基,所述基础培养基添加最低必须培养基非必需氨基酸。
8.根据权利要求1所述的化学培养体系,其特征在于,所述添加剂还包括生长因子和无机盐。
9.根据权利要求8所述的化学培养体系,其特征在于,所述生长因子包括维生素、黄体酮、腐胺及胰岛素;所述无机盐包括氯化钠、亚硒酸钠。
10.根据权利要求9所述的化学培养体系,其特征在于,所述维生素包括1ug/ml维生素E,1.2uM维生素 B12,64mg/L维生素C;所述黄体酮为6.3ng/ml,所述腐胺为23ug/ml,所述胰岛素为22ug/ml;所述氯化钠为0.5g/L,所述亚硒酸钠为13.6ug/L。
11.权利要求1-10任意一项所述化学培养体系在原代神经细胞培养和神经细胞系培养中的应用。
12.权利要求1-10任意一项所述化学培养体系在多能干细胞向神经干细胞诱导中的应用。
13.权利要求1-10任意一项所述化学培养体系在诱导干细胞神经定向分化及分化细胞培养中的应用。
14.根据权利要求13所述的应用,其特征在于,所述应用包括星状胶质细胞分化、DRG神经元分化培养或皮质神经元分化培养。
15.根据权利要求14所述的应用,其特征在于,所述DRG神经元分化及培养过程加入细胞因子。
16.根据权利要求14所述的应用,其特征在于,所述皮质神经元分化培养过程中加入化学小分子抑制剂。
17.权利要求1-10任意一项所述化学培养体系在类脑器官诱导中的应用。
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