[发明专利]一种检测EGFR基因G719S突变的系统在审
| 申请号： | 202110474207.2 | 申请日： | 2021-04-29 |
| 公开（公告）号： | CN113136431A | 公开（公告）日： | 2021-07-20 |
| 发明（设计）人： | 刘飞;冯攀;张立群;蒲晓允;项贵明;郭铭静 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军陆军军医大学第二附属医院 |
| 主分类号： | C12Q1/6886 | 分类号： | C12Q1/6886;C12Q1/686 |
| 代理公司： | 重庆强大凯创专利代理事务所(普通合伙) 50217 | 代理人： | 陈雍 |
| 地址： | 400037 *** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 egfr 基因 g719s 突变 系统 | ||
1.一种检测EGFR基因G719S突变的系统，其特征在于：包括微流控芯片和PCR扩增体系；所述微流控芯片包括PDMS腔室层，所述PDMS腔室层设有若干用于进行PCR反应的微腔室；所述PDMS腔室层的原料包括PDMS预聚体和Triton X-100；所述PCR扩增体系包括牛血清白蛋白。
2.根据权利要求1所述的一种检测EGFR基因G719S突变的系统，其特征在于：Triton X-100的质量为PDMS预聚体的质量的0.5％。
3.根据权利要求2所述的一种检测EGFR基因G719S突变的系统，其特征在于：所述牛血清白蛋白的浓度为0.1-0.8mg/mL。
4.根据权利要求3所述的一种检测EGFR基因G719S突变的系统，其特征在于：所述PCR扩增体系的引物包括序列如SEQ ID NO.1所示的正向引物和如SEQ ID NO.2所示的反向引物。
5.根据权利要求4所述的一种检测EGFR基因G719S突变的系统，其特征在于：所述PCR扩增体系还包括探针；所述探针包括序列如SEQ ID NO.3所示的突变型探针和序列如SEQ IDNO.4所示的野生型探针；所述探针的5’端连接有荧光报告基团，3’端连接有荧光淬灭基团。
6.根据权利要求5所述的一种检测EGFR基因G719S突变的系统，其特征在于：所述突变型探针的第七位碱基为锁核酸修饰碱基，所述野生型探针的第六位碱基为锁核酸修饰碱基；所述突变型探针的荧光报告基团为FAM，荧光淬灭基团为MGB；所述野生型探针的荧光报告基团为HEX，荧光淬灭基团为MGB。
7.根据权利要求6所述的一种检测EGFR基因G719S突变的系统，其特征在于：所述PCR扩增体系的正向引物和反向引物的浓度均为0.1-1.0μmol/L；突变型探针和野生型探针的浓度均为0.1-0.5μmol/L。
8.根据权利要求7所述的一种检测EGFR基因G719S突变的系统，其特征在于：PCR扩增体系的Tm值为55-58℃。
9.根据权利要求8所述的一种检测EGFR基因G719S突变的系统，其特征在于：系统灵敏度为3.01copies/μL。
10.根据权利要求1所述的一种检测EGFR基因G719S突变的系统，其特征在于：所述微腔室的深度为60μm，微腔室的横截面为正六边形，正六边形的对边之间的距离为40μm。
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