[发明专利]用于检测腺病毒55型的引物探针组、试剂盒及应用有效
申请号: | 202110471431.6 | 申请日: | 2021-04-29 |
公开(公告)号: | CN113151602B | 公开(公告)日: | 2022-06-21 |
发明(设计)人: | 毛乃颖;朱贞;周杨子 | 申请(专利权)人: | 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 薛红凡 |
地址: | 102206 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 检测 病毒 55 引物 探针 试剂盒 应用 | ||
本发明属于化学合成和诊断试剂检测技术领域,特别是涉及用于检测腺病毒55型的引物探针组、试剂盒及应用。本发明所述用于检测腺病毒55型的引物探针组包括Hexon引物探针组和Fiber引物探针组;所述Hexon引物探针组中引物和探针的核苷酸序列如SEQIDNO.1~3所示,所述Fiber引物探针组中引物和探针的核苷酸序列如SEQIDNO.4~6所示。本发明提供的探针和引物对腺病毒55型病毒核酸的检测敏感度下限低于46个拷贝,有极高的敏感度;使用本发明提供的探针和引物对腺病毒1型、3型、4型、5型、6型和7型和3株不同的风疹病毒进行检测,均未发现ROX或FAM信号,有极高的特异性。
技术领域
本发明属于化学合成和诊断试剂技术领域,特别是涉及用于检测腺病毒55型的引物探针组、试剂盒及应用。
背景技术
腺病毒的衣壳由六邻体、五邻体和纤突等蛋白组成,上述蛋白含有型、组和亚组抗原决定簇,是诊断不同血清型腺病毒的标准。
目前针对腺病毒的检测方法以六十年代临床建立的以免疫荧光为主的检测方法为主,但是主要针对的是3型和7型腺病毒,难以准确的分型检测其他血清型的腺病毒。
发明内容
为了解决上述问题,本发明提供了一种用于检测腺病毒55型的引物探针组、试剂盒及应用。本发明提供的引物探针组能够有效提高检测的特异性,ROX信号和FAM信号双阳性时,能使检测结果直接指向腺病毒55型阳性,有效避免误判腺病毒型的缺陷。
为了实现上述目的,本发明提供了如下技术方案:
本发明提供了用于检测腺病毒55型的引物探针组,所述引物探针组包括Hexon引物探针组和Fiber引物探针组;
所述Hexon引物探针组包括核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的正向引物HAdV11-hexon-F、核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的反向引物HAdV11-hexon-R和核苷酸序列如SEQID NO.3所示的探针HAdV11-hexon-Probe,所述探针HAdV11-hexon-Probe的3'端有淬灭基团,5'端有荧光基团;
所述Fiber引物探针组包括核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示的正向引物HAdV14-Fiber-F、核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示的反向引物HAdV14-Fiber-R和核苷酸序列如SEQID NO.6所示的探针HAdV14-Fiber-Probe,所述探针HAdV14-Fiber-Probe的3'端有淬灭基团,5'端有荧光基团。
优选的,所述淬灭基团包括BHQ1和BHQ2,所述荧光基团包括ROX和FAM。
本发明提供了上述引物探针组在检测腺病毒55型中的应用。
本发明还提供了一种用于检测腺病毒55型的试剂盒,所述试剂盒包括上述引物探针组和反应液。
优选的,所述反应液包括2×PCR Buffer和EX TAQ HS。
本发明提供了用于检测腺病毒55型的引物探针组,所述引物探针组包括Hexon引物探针组和Fiber引物探针组;
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