[发明专利]一种基于LFD-RMA法检测人鼻病毒的引物探针组在审
申请号: | 202110449742.2 | 申请日: | 2021-04-25 |
公开(公告)号: | CN113186343A | 公开(公告)日: | 2021-07-30 |
发明(设计)人: | 陈大为;陈龙;张瑶 | 申请(专利权)人: | 济南国益生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11;C12R1/93 |
代理公司: | 济南信在专利代理事务所(特殊普通合伙) 37271 | 代理人: | 黄波 |
地址: | 250100 山东省济南*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 lfd rma 检测 病毒 引物 探针 | ||
1.一种基于LFD-RMA法检测人鼻病毒的引物探针组,其特征在于,包括检测人鼻病毒的引物对及对应的探针,其中,引物和探针序列为:
HRV-F:
5’-CAGGAGGGAAGGATGGTAGAGAATGGGACACAG-3’;
HRV-R:
5’-[Biotin]TGCCAAACACTTTGATATCACTCGCTCCGGTTC-3’;
HRV-P:
5’-[FAM]TCACGATAACTTTCACAGGGTTGGGATCGGCA[dSpacer]ATTACATGTTCTATG[C3-spacer]-3’。
2.如权利要求1所述的一种基于LFD-RMA法检测人鼻病毒的引物探针组,其特征在于,所述下游引物的5’端用Biotin标记;探针的5’端用FAM标记,第33个碱基替换为THF(dSpacer),3’末端被阻断基团C3-spacer修饰;扩增产物大小不超过500bp。
3.如权利要求1所述的一种基于LFD-RMA法检测人鼻病毒的试剂盒,其特征在于,该试剂盒中包括有:含有扩增反应试剂的检测管、缓冲液、醋酸镁、标准阳性质粒、无菌双蒸水、侧流层析检测试纸条。
4.如权利要求3所述的一种基于LFD-RMA法检测人鼻病毒的试剂盒,其特征在于,所述扩增反应试剂单管分装,为干粉形态,包括终浓度各10μM的RMA引物对及检测探针组、100ng/μL的大肠杆菌RecA蛋白、40ng/μL的UvsY蛋白、800ng/μL的单链结合蛋白GP32、60ng/μL的Bst聚合酶、200ng/μL的M-MLV逆转录酶、80ng/μL的核酸内切酶IV。
5.如权利要求4所述的一种基于LFD-RMA法检测人鼻病毒的试剂盒,其特征在于,所述缓冲液包括下述组分:50mM的Tris、10%w/v的聚环氧乙烷、2mM的海藻糖、2.5mM的甘露醇、10mM的ATP、2mM的dNTPs、1000ng/mL的肌酸激酶和25mM的磷酸肌酸。
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