[发明专利]一种基于低共熔溶剂制备冷冻电镜检测样品的方法

权利要求书

1.一种基于低共熔溶剂制备冷冻电镜检测样品的方法，其特征在于，包括如下制备步骤：

S01、将氢键供体试剂和氢键受体试剂按预设比例混合，加热至40-80℃，反应1-2h后至澄清溶液状态，得到低共熔溶剂；

S02、将待检测酶、低共熔溶剂及缓冲溶液混合，即制备得到冷冻电子显微镜样本。

2.根据权利要求1所述的一种基于低共熔溶剂制备冷冻电镜检测样品的方法，其特征在于，酶选自糖苷转移酶、转氨酶、谷氨酸脱羧酶中的至少一种。

3.根据权利要求1所述的一种基于低共熔溶剂制备冷冻电镜检测样品的方法，其特征在于，氢键供体试剂氢键供体试剂选自多元醇、糖、有机酸及有机胺类化合物中的一种，或是它们的混合物；氢键受体试剂选自氯化胆碱、甜菜碱、L-脯氨酸类中的一种。

4.根据权利要求1所述的一种基于低共熔溶剂制备冷冻电镜检测样品的方法，其特征在于，氢键供体试剂和氢键受体试剂的摩尔比包括下述：1:1，1:2，1:4，2:1，2:3。

5.根据权利要求1所述的一种基于低共熔溶剂制备冷冻电镜检测样品的方法，其特征在于，加热温度为60℃。

6.根据权利要求1所述的一种基于低共熔溶剂制备冷冻电镜检测样品的方法，其特征在于，反应时间为1.5h。

7.根据权利要求1所述的一种基于低共熔溶剂制备冷冻电镜检测样品的方法，其特征在于，在步骤S02中，缓冲溶液选自氯化胆碱—甘油缓冲液、氯化胆碱—乙二醇缓冲液、氯化胆碱—1,2-丙二醇缓冲液中的至少一种。

8.根据权利要求1所述的一种基于低共熔溶剂制备冷冻电镜检测样品的方法，其特征在于，在步骤S02中，低共熔溶剂与缓冲溶液配比为1:3。