[发明专利]一种检测肺炎支原体的LAMP引物组、试剂盒及方法

权利要求书

1.一种用于检测肺炎支原体的LAMP引物组，其特征在于：所述引物组用于引导肺炎支原体的RNA扩增，所述引物组的核苷酸序列如下所示：

肺炎支原体外引物：

MP-F3：5'-GACCTGCAAGGGTTCGTTAT-3'，

MP-B3：5'-ACCTTCATCGTTCACGCG-3'；

肺炎支原体内引物：

MP-FIP：5'-CACGTCATTGCCTTGGTAGGCCTTGATGAGGGTGCGCCATA-3'，

MP-BIP:5'-ATGGGACTGAGACACGGCCCGCTCCATCAAGCTTTCGCT-3'；

肺炎支原体环引物：

MP-LF:5'-ACCCCACCAACTAGCTGA-3'，

MP-LB:5'-CAGCAGTAGGGAATTTTTCACA-3'。

2.如权利要求1所述的用于检测肺炎支原体的LAMP引物组，其特征在于：所述引物组中，MP-F3、MP-B3、MP-FIP、MP-BIP、MP-LF、MP-BF、MP-F4、MP-B4的摩尔比为2:2:16:16:4:4。

3.一种用于检测肺炎支原体的LAMP试剂盒，其特征在于：所述试剂盒包含如权利要求1或2所述的LAMP引物组。

4.如权利要求3所述的用于检测肺炎支原体的LAMP试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包含缓冲液和显色剂，或者缓冲液和显色剂的预混液。

5.一种肺炎支原体的检测方法，其特征在于：包括以下步骤:

S1、获得权利要求1或2所述的引物组和待测样本的RNA；

S2、配制LAMP反应体系，利用权利要求1或2所述的引物组引导所述RNA进行环介导等温扩增反应，观察反应体系的颜色变化；

所述检测方法不用于疾病的诊断和治疗。

6.如权利要求5所述的肺炎支原体的检测方法，其特征在于：所述待测样本的RNA通过磁珠法提取获得或者通过免提取法获得。

7.如权利要求5所述的肺炎支原体的检测方法，其特征在于：所述反应体系包括LAMP2X Mix 9-20μL，LAMP Primer Mix(10X)1-8μL，待测样本RNA 1-8μL，dH₂O 7-15μL。

8.如权利要求7所述的肺炎支原体的检测方法，其特征在于：所述LAMP Primer Mix(10X)中，MP-FIP和MP-BIP浓度为16μmol/L，MP-F3和MP-B3浓度为2μmol/L，MP-LF和MP-LB浓度为4μmol/L。

9.如权利要求5所述的肺炎支原体的检测方法，其特征在于：所述环介导等温扩增反应的温度为65℃，反应时间为15-30min。

10.如权利要求9所述的肺炎支原体的检测方法，其特征在于：所述反应时间为20min。