[发明专利]一种四环吡咯生物碱类化合物及其制备方法和用途

说明书

本发明公开了一种四环吡咯生物碱类化合物及其制备方法和用途，特点是该生物碱类化合物的结构式如Ⅰ所示，其分子式为C₂₇H₃₇NO₅，其制备方法步骤包括将保藏号为CCTCC NO：M2014086的焦曲霉通过微生物发酵培养来获取四环吡咯生物碱类化合物的发酵物，然后将发酵物用乙酸乙酯浸泡提取得粗浸膏，经减压硅胶柱层析，凝胶柱层析，中压柱层析和反相半制备高效液相色谱分离纯化得到，优点是该四环吡咯生物碱类具有抗枯草芽孢杆菌的作用，因此可以用于开发预防和治疗由枯草芽孢杆菌所引起的病害和感染的药物。

技术领域

本发明涉及一种生物碱类化合物，尤其是涉及一种从海洋真菌中提取的四环吡咯生物碱类化合物及其制备方法和用途。

背景技术

生物碱是一类具有广泛活性的化学实体，具有抗菌、消炎、抗癌和抗病毒作用，已被证明在兽医、药理学、药物和植物保护等方面具有巨大潜力。著名的生物碱包括抗微菌剂（血根碱和黄连素）、肌肉松弛药（罂粟碱）、麻醉性镇痛药（吗啡和可待因）以及用于帕金森氏病治疗的阿扑吗啡。生物碱是用来描述种类繁多的具有类似碱性质的化学药品的一个术语，其至少在杂环中含有一个氮原子且通常被认为是由赖氨酸、酪氨酸和色氨酸等合成。由于自然界中细菌对抗生素的耐药性的不断增强，生物碱不仅假定为能减少细菌和真菌的侵染，而且被科学界认为是一种在将来可能成为抵抗微生物相关疾病的关键分子。

在药物开发过程中，海洋来源的真菌逐渐成为结构多样且具有生物活性的天然产物的潜在宝库。在近年天然产物的研究中，曲霉属因其不断被报道出具有显著生物活性且结构独特次级代谢产物如生物碱、萜烯、肽和聚酮类化合物而闻名。

本发明人基于对海洋真菌Aspergillus ustus（保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCC NO：M2014086）在大米发酵下的乙酸乙酯提取物的化学成分研究中，发现了一个稀有的四环吡咯生物碱，遂对其进行了抑菌活性评估。目前尚未见该化合物的化学结构及抑菌活性的报道，因此市场上也尚未见有与此相关的药物。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种对枯草芽孢杆菌具有抑制作用的四环吡咯生物碱类化合物及其制备方法和用途。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种四环吡咯生物碱类化合物，该四环吡咯生物碱类化合物的结构式如（I）所示；

（I）。

上述四环吡咯生物碱化合物的制备方法，包括如下步骤：

（1）发酵生产

将保藏号为CCTCC NO：M2014086的焦曲霉（Aspergillusustus）在固体PDA培养基的平板上划线，于28 ℃培养箱中培养活化7 天后，挑取单菌落接种于PDB培养基中，于温度28 ℃、180 rpm/min的转速下置于摇床上培养，培养2 天后收集种子液，然后将种子液按体积比10 %的接种量接种到大米培养基中，于温度28 ℃培养30 天，获得发酵物；

（2）浸膏提取

在步骤（1）得到的发酵物中加入等体积比的乙酸乙酯，反复浸泡3次后，对乙酸乙酯浸提液减压蒸干后，加入由乙酸乙酯和水等体积混合得到的溶液重复萃取3次，合并三次萃取所得乙酸乙酯相，最后将乙酸乙酯萃取液减压浓缩蒸干后，获得粗浸膏；

（3）化合物的分离制备