[发明专利]一种18联呼吸道病毒核酸联合检测装置

说明书

本发明涉及一种18联呼吸道病毒核酸联合检测装置，属于荧光定量PCR的核酸检测技术领域。采用实时荧光定量PCR，扩增时加入18对引物和病毒特异性的荧光探针，探针为寡核苷酸，两端分别标记一个荧光报告基团和一个淬灭荧光基团。检测分4组，其中3组为RNA标本，需要先进行反转录RT操作，得到DNA单链，每组为一个PCR反应管，提前预装了反应缓冲液以及引物和探针，其中包括了一个内参照品的引物及探针，检测到特异病毒时，对应的探针被降解，使报告基团释放出荧光信号，产生阳性结果。本发明采用多通道检测方案，任何重叠感染均可同时检出所有病原体，适用于人鼻咽拭子、口咽拭子、鼻腔擦拭液、鼻咽分泌物和支气管肺泡灌洗液样本，以及经过NaOH处理的痰液标本。

技术领域

本发明涉及荧光定量PCR的核酸检测技术领域，具体是一种18联呼吸道病毒核酸联合检测装置。

背景技术

呼吸道感染病原学复杂，包括细菌、病毒、支原体、衣原体、真菌等，其中80％以上是病毒性的。该病四季、任何年龄均可发病，通过含有病毒的飞沫、雾滴，或经污染的用具进行传播。研究表明，有较多的呼吸道感染属于多重病毒感染(29％)。常于机体抵抗力降低时，如受寒、劳累、淋雨等情况，原已存在或由外界侵入的病毒或/和细菌，迅速生长繁殖，导致感染，一般5-7天痊愈。常继发支气管炎、肺炎、副鼻窦炎，少数人可并发急性心肌炎、肾炎、风湿热等。呼吸道感染是世界范围内低龄儿童(5岁)死亡的首位原因，儿童上呼吸道感染的患病次数平均为3-8次/年，下呼吸道感染率比URTI低，在1岁儿童中感染的比例约1～3％，学龄儿童至5％～10％。呼吸道病毒习惯上是指侵害呼吸道的病毒，至少涉及到8个科，200多种型别的病毒。临床常见的可导致呼吸道感染的病毒有腺病毒(AdV)、甲型流感病毒(FluA和FluB)、呼吸道合胞病毒(RSV)，人偏肺病毒(MPV)、副流感病毒1-4型(PIVl-PIV4)、鼻病毒(hRV)、冠状病毒(OC43、229E/NL63)、肠道病毒(hEV)和人博卡病毒(hBoV)，新冠状病毒(COVID-19)，风疹，流行性腮腺炎。

呼吸道病毒是呼吸道感染最重要的病原体之一，随着抗病毒药物的广泛应用，越来越多的病毒对抗感染的一线药物产生耐药性，且近年来不断有新发病毒威胁着全人类的健康，而快速、灵敏、特异的检测方法有助于疫情暴发流行的控制和防止药物的滥用。传统呼吸道检测依赖于免疫学方法和组织分离培养，虽然组织分离培养为金标准，但是检测时间需要几天甚至几周，因此其结果很难用于临床治疗的指导。免疫学方法虽然其检测快速，在几个小时内得到结果，但是假阳性较高。目前，分子检测技术以其高灵敏、高特异、快速的特点日渐成熟，荧光定量PCR的核酸检测高通量平台是目前最具有发展前景的病毒检测方法。荧光定量PCR的方法通过其定量可以直接反应患者的感染情况，并且能够进行定期检测达到指导预后的效果，对临床诊断具有标志性意义。

目前公布的相关类型的病毒检测均是介绍的单一的检测方法，对重叠感染则不能同时检出所有病原体，检测效率低。

发明内容

本发明提供一种18联呼吸道病毒核酸联合检测装置，以解决呼吸道病毒单一检测存在对重叠感染则不能同时检出所有病原体，检测效率低的问题。

本发明采取的技术方案是：包括下列试剂：

管1：

DNA QPCR Supermix 2X 30μL；

(1)、流行性感冒病毒A型FluA特异性基因片段的序列如SEQ ID No.1所示，其引物是：

正向引物1，5’-CACCCTTGGCCTCGACATTA-3’：0.5μL；

反向引物1，5’-ATTTCCTCGAGGGTCATGTC-3’：0.5μL；

探针1，FAM-5’-GAATCCAGCGAGACACTTAG-3’-BHQ-1：0.5μL；