[发明专利]快速检测猫杯状病毒的方法及检测用引物和试剂盒

权利要求书

1.快速检测猫杯状病毒的引物及探针，其特征在于快速检测猫杯状病毒的上游引物ERA-F的序列为：5'-GTCTCAAACTCTGAGCTTCGTGCTTAAAAC-3'；

快速检测猫杯状病毒的下游引物ERA-R的序列为：5’-Biotin-ACTTAGGACATACATCATAACTAGCACAAG-3’；

快速检测猫杯状病毒的探针Probe的序列为：5’-FAM-AAACTCTGAGCTTCGTGCTTAAAACTCACA[THF]TGTCCGTAAGGACTT-C3 Spacer-3’。

2.快速检测猫杯状病毒的RT-ERA核酸试纸条扩增试剂盒，其特征在于该检测猫杯状病毒的RT-ERA核酸试纸条扩增试剂盒包含权利要求1所述的引物及探针、阳性对照样品、等温核酸扩增试剂盒和试纸条；

其中，阳性对照样品中含猫杯状病毒ORF1区域RNA序列；

等温核酸扩增试剂盒中包括重组酶冻干酶粉、溶解剂、激活剂、RNA酶抑制剂和RNase-free H₂O。

3.根据权利要求2所述的快速检测猫杯状病毒的RT-ERA核酸试纸条扩增试剂盒，其特征在于所述的试纸条含有抗生物素抗体、抗FAM抗体、抗鼠抗体和金标颗粒。

4.快速检测猫杯状病毒的方法，该方法为非疾病的诊断方法，其特征在于快速检测猫杯状病毒按以下步骤进行：

一、在离心管中配置下列溶液：15 μL溶解剂、2.1 μL上游引物ERA-F、2.1 μL下游引物ERA-R、0.6 μL探针Probe、0.5 μL RNA酶抑制剂和2~6 μL待测样品，RNase-free H₂O 补充至48 μL，振荡混匀并离心；将上述48 μL的混合溶液转移至含有重组酶冻干酶粉的反应管中，振荡混匀直至完全溶解，再在反应盖上加2 μL激活剂，离心5~6 s后，40℃水浴锅中反应30 min；

二、用试纸条检测步骤一反应产物，获得检测结果；

三、结果判读：直接肉眼观察

①阴性：仅在质控线有一条红色条带，在检测线没有红色条带，表明待检样本无猫杯状病毒感染；

②阳性：在质控线和检测线均有一条红色条带，表明待检样本中有猫杯状病毒感染；

③无效：在质控线和检测线均无红色条带，表明试纸条失效。

5.根据权利要求4所述的快速检测猫杯状病毒的方法，其特征在于所述的试纸条含有抗生物素抗体、抗FAM抗体、抗鼠抗体和金标颗粒。