[发明专利]一种FZD7鼠源单克隆抗体及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种FZD7鼠源单克隆抗体，其包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO:1所示序列具有至少99％序列同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区包含如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列或与SEQ ID NO:2所示序列具有至少99％序列同一性的氨基酸序列。

2.如权利要求1所述的FZD7鼠源单克隆抗体，其特征在于，所述的FZD7鼠源单克隆抗体还包含重链恒定区和轻链恒定区；所述重链恒定区的亚类为IgG1，所述轻链恒定区为kappa链。

3.如权利要求1或2所述的FZD7鼠源单克隆抗体，其特征在于，所述FZD7鼠源单克隆抗体靶向的目的蛋白含有如SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列。

4.如权利要求1或2所述的FZD7鼠源单克隆抗体，其特征在于，其存在于全长抗体、Fab、Fab’、F(ab’)₂、Fv、双特异性抗体或多特异性抗体内。

5.如权利要求1～4任一项所述的FZD7鼠源单克隆抗体，其特征在于，其制备方法包括如下步骤：

(1)构建表达载体以表达如SEQ ID NO:4所示的DNA序列，得FZD7linker蛋白；

(2)使用步骤(1)所得FZD7 linker蛋白免疫小鼠；

(3)取免疫合格的小鼠，制备脾脏细胞悬液与SP2/0骨髓瘤细胞融合制成杂交瘤细胞；

(4)腹水制备抗体。

6.一种分离的核酸，其编码如权利要求1～5任一项所述的FZD7鼠源单克隆抗体。

7.一种重组表达载体，其包含如权利要求6所述分离的核酸；优选地，所述重组表达载体为质粒、粘粒、噬菌体或病毒载体，所述病毒载体优选逆转录病毒载体、慢病毒载体、腺病毒载体或腺相关病毒载体；所述重组表达载体的骨架优选质粒pET28a-Sumo。

8.一种转化体，其在宿主细胞中包含如权利要求7所述的重组表达载体。

9.一种嵌合抗原受体，其包含如权利要求1～5任一项所述的FZD7鼠源单克隆抗体。

10.一种基因修饰的细胞，其特征在于，其包含如权利要求9所述的嵌合抗原受体；优选地，所述基因修饰的细胞为真核细胞，优选分离的人细胞；更优选免疫细胞如T细胞，或NK细胞。

11.一种FZD7鼠源单克隆抗体的制备方法，其包含培养如权利要求8所述的转化体，从培养物中获得FZD7鼠源单克隆抗体。

12.一种抗体药物偶联物，其包含细胞毒性剂，以及如权利要求1～5任一项所述的FZD7鼠源单克隆抗体；优选地，所述细胞毒性剂为MMAF或MMAE。

13.一种药物组合物，其包含如权利要求1～5任一项所述的FZD7鼠源单克隆抗体和/或如权利要求12所述的抗体药物偶联物，以及药学上可接受的载体，所述药物组合物优选特异性靶向FZD7的癌症相关治疗药物；

较佳地，所述药物组合物还含有由激素制剂、靶向小分子制剂、蛋白酶体抑制剂、成像剂、诊断剂、化疗剂、溶瘤药物、细胞毒性剂、细胞因子、共刺激分子的激活剂、抑制性分子的抑制剂以及疫苗组成的群组中的一种或多种。

14.如权利要求1～5任一项所述的FZD7鼠源单克隆抗体、权利要求12所述的抗体药物偶联物和/或权利要求13所述的药物组合物在制备诊断、预防和/或治疗特异性靶向FZD7相关癌症的药物中的应用；优选地，所述肿瘤为FZD7阳性肿瘤。