[发明专利]一种冷冻保护剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种冷冻保护剂，其特征在于，所述冷冻保护剂包含式(I)所示结构的两亲性化合物：

2.如权利要求1所述的冷冻保护剂，其特征在于，所述冷冻保护剂还包含缓冲液。

优选地，所述冷冻保护剂还可以包含水溶性糖和/或多元醇。

优选地，所述水溶性糖可以选自蔗糖、海藻糖、半乳糖、聚蔗糖和葡聚糖等中的至少一种。

优选地，所述多元醇可以选自乙二醇、β-巯基乙醇、甘油、1,3-丙二醇、1,2-丙二醇和2,3-丁二醇等中的至少一种。

3.如权利要求1或2所述的冷冻保护剂，其特征在于，所述冷冻保护剂中，式(I)所示的两亲性化合物的浓度可以为0.5-350mM。

优选地，所述冷冻保护剂中，水溶性糖的浓度可以为0.1-4.0M。

优选地，所述冷冻保护剂中，多元醇的含量为0.1-40v/v％。

4.权利要求1-3任一项所述的冷冻保护剂，其特征在于，所述两亲性化合物由如下方法制备得到：葡萄糖酸内酯与缬氨酸反应制备得到所述两亲性化合物。

5.一种抑冰材料和/或控冰材料，其特征在于，含有权利要求1-3任一项所述的两亲性化合物。

6.权利要求1-4任一项所述的冷冻保护剂的制备方法，其特征在于，以含所述式(I)所示结构的两亲性化合物的组分为原料制备得到所述冷冻保护剂。

优选地，所述制备方法包括将式(I)所示的两亲性化合物、缓冲液以及水溶性糖和/或多元醇混合，制备得到所述冷冻保护剂。

7.权利要求1-4任一项所述的冷冻保护剂和/或权利要求6所述的制备方法制得的冷冻保护剂在细胞、组织或器官冷冻保存中的应用，例如用作细胞、组织或器官的冷冻保护剂。优选用于细胞、组织或器官的控冰冻存保护剂。

8.如权利要求7所述的用途，其特征在于，所述细胞、组织和器官包括但不限于人或动物的以下细胞、组织或器官：体细胞、各类干细胞、生殖细胞，卵巢组织/器官、睾丸组织、脐带组织、胎盘组织、胰岛组织、肝组织、脂肪组织、结缔组织、心脏组织、神经组织、牙髓组织、肺脏、肝脏、肾脏、心脏、卵巢、胰腺等。

优选地，所述体细胞包括各种组织或器官的细胞，例如红细胞、软骨细胞、肝细胞等；

优选地，所述干细胞例如可以为全能干细胞、多能干细胞或者专能干细胞，包括但不限于胚胎干细胞、间充质干细胞、造血干细胞、神经干细胞等；

优选地，所述间充质干细胞为脐带间充质干细胞、脂肪间充质干细胞或骨髓间充质干细胞(例如人骨髓间充质干细胞)等；

优选地，所述神经干细胞为多巴胺能神经元前体细胞；

优选地，所述生殖细胞为卵母细胞或精子细胞。

9.如权利要求7或8所述的用途，其特征在于，所述冷冻保护剂用于干细胞冷冻保存，示例性用于人骨髓间充质干细胞的冷冻保存。

10.一种细胞、组织或器官的冻存方法，其特征在于，所述冻存方法使用权利要求1-4任一项所述的冷冻保护剂和/或权利要求6所述的制备方法制得的冷冻保护剂对细胞、组织或器官进行冻存。