[发明专利]一种低清洗残留磁珠及其制备方法有效
申请号: | 202110329505.2 | 申请日: | 2021-03-28 |
公开(公告)号: | CN112979772B | 公开(公告)日: | 2022-06-24 |
发明(设计)人: | 杨志伟;刘铮;胡春苗 | 申请(专利权)人: | 江苏集萃分子工程研究院有限公司;苏州易莱生物技术有限公司 |
主分类号: | C07K14/36 | 分类号: | C07K14/36;C07K1/13;C07K1/113;C07C51/09;C07C59/68;C07C67/31;C07C69/712 |
代理公司: | 苏州瞪羚知识产权代理事务所(普通合伙) 32438 | 代理人: | 张宇 |
地址: | 215500 江苏省苏州市常熟*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 清洗 残留 及其 制备 方法 | ||
本发明属于电化学检测材料技术领域,具体涉及一种低清洗残留磁珠及其制备方法。该磁珠是由羟基和炔基表面修饰的磁珠与三[(1‑苄基‑1H‑1,2,3‑三唑‑4‑基)甲基]胺‑铜(I)络合物和叠氮化合物标记的链霉亲和素进行反应制得。本发明的有益效果是:本发明通过先对氨基磁珠表面进行羟基和炔基的修饰;然后将三[(1‑苄基‑1H‑1,2,3‑三唑‑4‑基)甲基]胺‑铜(I)络合物和叠氮化合物标记的链霉亲和素对氨基磁珠进行进一步表面修饰,制得一种低清洗残留磁珠,有效降低了磁珠在电极表面的残留,可以更容易被清洗液洗去。
技术领域
本发明属于电化学检测材料技术领域,具体涉及一种低清洗残留磁珠及其制备方法。
背景技术
磁珠是发展起来的一项新的免疫学技术,它将固化试剂特有的优点与免疫学反应的高度特异性结合于一体,以免疫学为基础,渗透到病理、生理、药理、微生物、生化以及分子遗传学等各个领域,其在免疫检测、细胞分离、生物大分子纯化和分子生物学等方面得到了越来越广泛的应用。
在使用磁珠进行的电化学发光检测中,通电之后磁珠在电极表面发生氧化还原反应。在这一过程中,会导致电极表面和磁珠表面产生电磁相互作用,从而使得磁珠吸附在电极表面,导致检测后不易从电极表面清洗干净。残余磁珠使得检测背景增高,降低了仪器的检出限。
发明内容
针对背景技术中存在的技术问题,本发明一目的在于提供一种低清洗残留磁珠,有效降低磁珠在电极表面残留。
本发明另一目的在于提供一种低清洗残留磁珠的制备方法。
实现本发明一目的而采用的技术方案为:一种低清洗残留磁珠,其结构如下:
其中,SA为蛋白质分子链霉亲和素。
优选的,本发明所述磁珠是由羟基和炔基表面修饰的磁珠与三[(1-苄基-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲基]胺-铜(I)络合物和叠氮化合物标记的链霉亲和素进行反应制得。
更优选地,本发明所述羟基和炔基表面修饰的磁珠是由氨基磁珠与活化酯混合物进行反应制得,所述活化酯混合物是由5-(4,4'-二甲氧基三苯基甲氧基)-戊酸、4-戊炔酸、二环己基碳二亚胺和、N-羟基丁二酰亚胺和DMF反应制得。
进一步优选地,本发明所述氨基磁珠与活化酯混合物进行反应具体步骤为:1)将5-(4,4'-二甲氧基三苯基甲氧基)-戊酸和4-戊炔酸置于反应管中,加入二环己基碳二亚胺和N-羟基丁二酰亚胺和DMF,进行反应得到活化酯混合物,其中,所述的5-(4,4'-二甲氧基三苯基甲氧基)-戊酸、4-戊炔酸、二环己基碳二亚胺和、N-羟基丁二酰亚胺和DMF的质量体积比为50mg:25mg:25mg:13mg:1mL;2)向氨基磁珠中加入所制得的活化酯混合物,室温下震荡反应,然后加入质量百分含量10% TFA的DMF溶液,得到羟基和炔基表面修饰的磁珠。
进一步优选地,本发明所述的5-(4,4'-二甲氧基三苯基甲氧基)-戊酸,其由如下步骤制得:
1)制备第一反应溶液,向5-羟基戊酸苄酯溶液中加入4,4'-二甲氧基三苯基氯甲烷、4-二甲氨基吡啶,在氩气保护下进行反应,得到所述第一反应溶液;
2)制备有机产物,将步骤1)所述第一反应溶液进行分离后得到的有机相进行洗涤干燥,得到所述有机产物;
3)制备第二反应溶液,向所述有机产物中加入乙酸乙酯、三乙胺和催化剂Pd/C,通入氢气后进行反应,得到所述第二反应溶液;
4)将所述第二反应溶液进行过滤、真空除去溶剂后,制得5-(4,4'-二甲氧基三苯基甲氧基)-戊酸。
进一步优选地,本发明所述的5-(4,4'-二甲氧基三苯基甲氧基)-戊酸的结构式为:
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