[发明专利]一种低清洗残留磁珠及其制备方法

权利要求书

1.一种低清洗残留磁珠，其特征在于：其结构如下：

其中，SA为蛋白质分子链霉亲和素。

2.根据权利要求1所述的低清洗残留磁珠，其特征在于：所述磁珠是由羟基和炔基表面修饰的磁珠与三[(1-苄基-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲基]胺-铜（I）络合物和叠氮化合物标记的链霉亲和素进行反应制得。

3.根据权利要求2所述的低清洗残留磁珠，其特征在于：所述羟基和炔基表面修饰的磁珠是由氨基磁珠与活化酯混合物进行反应制得，所述活化酯混合物是由5-(4,4'-二甲氧基三苯基甲氧基)-戊酸、4-戊炔酸、二环己基碳二亚胺和、N-羟基丁二酰亚胺和DMF反应制得。

4.根据权利要求3所述的低清洗残留磁珠，其特征在于：所述氨基磁珠与活化酯混合物进行反应具体步骤为：1）将5-(4,4'-二甲氧基三苯基甲氧基)-戊酸和4-戊炔酸置于反应管中，加入二环己基碳二亚胺和N-羟基丁二酰亚胺和DMF，进行反应得到活化酯混合物，其中，所述的5-(4,4'-二甲氧基三苯基甲氧基)-戊酸、4-戊炔酸、二环己基碳二亚胺和、N-羟基丁二酰亚胺和DMF的质量体积比为50mg:25mg:25mg:13mg:1mL；2）向氨基磁珠中加入所制得的活化酯混合物，室温下震荡反应，然后加入TFA的DMF溶液，得到羟基和炔基表面修饰的磁珠。

5.根据权利要求4所述的低清洗残留磁珠，其特征在于：所述的5-(4,4'-二甲氧基三苯基甲氧基)-戊酸，其由如下步骤制得：

1）制备第一反应溶液，向5-羟基戊酸苄酯溶液中加入4,4'-二甲氧基三苯基氯甲烷、4-二甲氨基吡啶，在氩气保护下进行反应，得到所述第一反应溶液；

2）制备有机产物，将步骤1）所述第一反应溶液进行分离后得到的有机相进行洗涤干燥，得到所述有机产物；

3）制备第二反应溶液，向所述有机产物中加入乙酸乙酯、三乙胺和催化剂Pd/C，通入氢气后进行反应，得到所述第二反应溶液；

4）将所述第二反应溶液进行过滤、真空除去溶剂后，制得5-(4,4'-二甲氧基三苯基甲氧基)-戊酸。

6.根据权利要求5所述的低清洗残留磁珠，其特征在于：

所述的5-(4,4'-二甲氧基三苯基甲氧基)-戊酸的结构式为：

；

所述有机产物的结构式为：

。

7.根据权利要求2所述的低清洗残留磁珠，其特征在于：所述的叠氮化合物标记的链霉亲和素是由链霉亲和素和5-叠氮戊酸的N-羟基丁二酰亚胺酯进行震荡反应后纯化制得，所述5-叠氮戊酸的N-羟基丁二酰亚胺酯由5-叠氮戊酸、二环己基碳二亚胺和 N-羟基丁二酰亚胺和DMF进行反应制得，其中，所述的5-叠氮戊酸、二环己基碳二亚胺、N-羟基丁二酰亚胺和DMF的质量体积比为14.3mg:25mg:13mg:1 mL。

8.一种制备如权利要求1所述低清洗残留磁珠的方法，其特征在于：其包括制备步骤：

1）活化酯混合物的制备

将5-(4,4'-二甲氧基三苯基甲氧基)-戊酸和4-戊炔酸置于反应管中，加入二环己基碳二亚胺和N-羟基丁二酰亚胺和DMF，室温下进行反应得到活化酯混合物，其中，所述的5-(4,4'-二甲氧基三苯基甲氧基)-戊酸、4-戊炔酸、二环己基碳二亚胺和、N-羟基丁二酰亚胺和DMF的质量体积比为50mg:25mg:25mg:13mg:1mL；

2）磁珠表面进行羟基和炔基的修饰

向氨基磁珠中加入步骤1）所制得的活化酯混合物，室温下震荡反应，然后加入TFA的DMF溶液，得到羟基和炔基表面修饰的磁珠；

3）低清洗残留磁珠的制备

将步骤2）制得的羟基和炔基表面修饰的磁珠与三[(1-苄基-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲基]胺-铜（I）络合物和叠氮化合物标记的链霉亲和素进行反应。