[发明专利]一种基于颗粒细胞基因表达检测内异症相关IVF结局的方法

权利要求书

1.检测颗粒细胞NR5A2、MAP3K5、PGRMC2、TXNIP、ATP2B4、DEPTOR、ITGAV、KPNB1、PRKAR2A、GPC6、KDM5A、EIF3A、SMC5、DUSP1基因表达量的试剂在制备检测子宫内膜异位症相关IVF结局试剂盒中的应用，所述试剂盒的检测方法依次按以下步骤进行：

1）通过Trizol法或者RNA试剂盒提取卵母细胞周围的颗粒细胞RNA；

2）使用逆转录试剂盒在PCR仪中将RNA逆转为cDNA；

3）用qPCR技术对逆转录得到的颗粒细胞cDNA进行PCR扩增，并通过qPCR仪进行实时荧光定量检测，获得作为生物标志物的若干样品基因NR5A2、MAP3K5、PGRMC2、TXNIP、ATP2B4、DEPTOR、ITGAV、KPNB1、PRKAR2A、GPC6、KDM5A、EIF3A、SMC5、DUSP1的平均循环阈值，以管家基因GAPDH作为内参基因；

4）先计算不同生物标志物的预测值Y_CT，然后与预测值Y_CT最佳界值点cut-off进行比对；

不同生物标志物的预测值Y_CT为：不同生物标志物的平均循环阈值减去内参基因GAPDH的CT值；

预测值Y_CT最佳界值点cut-off为：灵敏度和特异度之和最大值时相对应的预测值；

5）若比对发现NR5A2、MAP3K5、PGRMC2、TXNIP、ATP2B4、DEPTOR、ITGAV、KPNB1、PRKAR2A、GPC6、KDM5A、EIF3A、SMC5中的一个或几个基因的预测值Y_CT小于其相应的cut-off值，则说明其可能发生子宫内膜异位症相关异常IVF结局；若检测到DUSP1的预测值Y_CT大于其相应的cut-off值，则说明其可能发生子宫内膜异位症相关异常IVF结局。