[发明专利]连接酶突变体

说明书

本发明的课题是提供具有优异性质的连接酶突变体。本发明的解决手段是下述(1)、(2)或(3)的连接酶突变体：(1)包含与SEQ ID NO:1的氨基酸序列显示95%以上的同一性的氨基酸序列且具有核酸的连接活性的连接酶突变体；(2)包含与SEQ ID NO:2的氨基酸序列显示90%以上的同一性的氨基酸序列且具有核酸的连接活性的连接酶突变体；或者(3)包含与SEQ ID NO:3的氨基酸序列显示97%以上的同一性的氨基酸序列且具有核酸的连接活性的连接酶突变体。

技术领域

本发明涉及连接酶突变体。

背景技术

T4 RNA连接酶2是在ATP的存在下具有核糖核苷酸的连接能力的RNA连接酶(EC6.5.1.3)的一种，是来源于具有对埃希氏菌(Escherichia)的感染能力的T4噬菌体的酶(NP_049790)。T4 RNA连接酶2具有通过形成磷酸二酯键而将核酸的5'末端的磷酸基(供体)连接于3'末端的羟基(受体)的能力。T4 RNA连接酶2被用于具有突出末端的双链RNA的连接、和双链RNA中的切口(nick)的连接等的反应。已知对于T4 RNA连接酶2而言，不仅限于RNA，而且DNA以及除DNA和RNA以外的修饰核酸也可用作底物。此外，还已知T4RNA连接酶2有数种突变体。关于T4RNA连接酶2的现有技术，可参照下述文献。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：国际公开第2008/094599号。

非专利文献

非专利文献1：[在线],互联网,NCBI蛋白数据库(NCBI Protein Database),2018年8月13日,NP_049790,检索日:2020年2月27日,URL,https://www.ncbi.nlm.nih.gov/protein/NP_049790非专利文献2：Chauleau,M.,Shuman,S.(2013).Kinetic mechanismof nick sealing by T4 RNA ligase 2and effects of3'-OH base mispairs anddamaged base lesions.RNA,19(12):1840-1847.；

非专利文献3：Nandakumar,J.,Shuman,S.,Lima,C.D.(2006).RNA ligasestructures reveal the basis for RNA specificity and conformational changesthat drive ligation forward.Cell,6；127(1):71-84.；

非专利文献4：Ho,C.K.,Shuman,S.(2002).Bacteriophage T4 RNA ligase 2(gp24.1)exemplifies a family of RNA ligases found in all phylogeneticdomains.PNAS,1；99(20):12709-14.；

非专利文献5：Nandakumar,J.,Ho,C.K.,Lima,C.D.,Shuman,S.(2004).RNAsubstrate specificity and structure-guided mutational analysis ofbacteriophage T4 RNA ligase 2.J.Biol.Chem.,23；279(30):31337-47.；

非专利文献6：Nandakumar,J.Shuman,S.(2004).How an RNA ligasediscriminates RNA versus DNAdamage.Mol.Cell.,22；16(2):211-21.；

非专利文献7：Nandakumar,J.Shuman,S.(2005).Dual mechanisms whereby abroken RNA end assists the catalysis of its repair by T4 RNA ligase2.J.Biol.Chem.,24；280(25):23484-9.；