[发明专利]连接酶突变体在审
申请号: | 202110307117.4 | 申请日: | 2021-03-23 |
公开(公告)号: | CN113444698A | 公开(公告)日: | 2021-09-28 |
发明(设计)人: | 小西美和;梶本祥平;萩原佑介;三原康博;中野祥吾;本山智晴;伊藤创平 | 申请(专利权)人: | 味之素株式会社 |
主分类号: | C12N9/00 | 分类号: | C12N9/00;C12N15/52;C12N15/70;C12N15/62;C12N1/21;C12P19/34;C12N15/113;C12N15/10;C12R1/19 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 卢曼;梅黎 |
地址: | 日本东京都*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 连接酶 突变体 | ||
1.下述(1)、(2)或(3)的连接酶突变体:
(1)包含与SEQ ID NO:1的氨基酸序列显示95%以上的同一性的氨基酸序列且具有核酸的连接活性的连接酶突变体;
(2)包含与SEQ ID NO:2的氨基酸序列显示90%以上的同一性的氨基酸序列且具有核酸的连接活性的连接酶突变体;或者
(3)包含与SEQ ID NO:3的氨基酸序列显示97%以上的同一性的氨基酸序列且具有核酸的连接活性的连接酶突变体。
2.根据权利要求1所述的连接酶突变体,其中,核酸是可包含DNA和/或修饰核酸的单链RNA或双链RNA。
3.一种核酸产物的制造方法,其中,该方法包括:在权利要求1或2所述的连接酶突变体的存在下连接核酸材料而生成核酸产物,
核酸材料选自单链核酸材料、双链核酸材料、及它们的混合物。
4.根据权利要求3所述的方法,其中,核酸材料为RNA。
5.根据权利要求3所述的方法,其中,核酸材料为4条以上的单链RNA。
6.根据权利要求3所述的方法,其中,核酸产物包含长度为12~27个碱基的互补部分。
7.根据权利要求3所述的方法,其中,核酸材料包含DNA和/或修饰核酸。
8.根据权利要求3所述的方法,其中,核酸材料的浓度为1μM以上。
9.根据权利要求3所述的方法,其中,核酸产物为siRNA。
10.一种多核苷酸,其编码权利要求1或2所述的连接酶突变体。
11.一种表达载体,其包含权利要求10所述的多核苷酸。
12.一种转化微生物,其包含表达单元,
所述表达单元包含:编码权利要求1或2所述的连接酶突变体的多核苷酸、以及与其可操作地连接的启动子。
13.一种连接酶突变体的制造方法,该方法包括:使用包含表达单元的转化微生物,该表达单元包含编码权利要求1或2所述的连接酶突变体的多核苷酸以及与其可操作地连接的启动子,以生成所述连接酶突变体。
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