[发明专利]具有融合前早期构象的SARS-CoV-2 S三聚体蛋白及其应用

权利要求书

1.融合蛋白，其包含严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)的S蛋白或其变体序列、以及三聚化结构域序列；

其中，所述S蛋白变体与野生型S蛋白(例如SEQ ID NO:1所示的S蛋白)相比具有一个或几个氨基酸的置换、缺失或添加(例如1个，2个，3个，4个，5个，6个，7个，8个，9个或10个氨基酸的置换、缺失或添加)，或者与野生型S蛋白相比具有至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％的序列同一性，并且所述S蛋白变体具有野生型S蛋白的免疫学活性(例如，在受试者中诱导针对SARS-CoV-2的特异性免疫应答如中和抗体应答的活性)。

2.权利要求1所述的融合蛋白，其中，所述三聚化结构域序列包含如SEQ ID NO:3所示的序列。

3.权利要求1或2所述的融合蛋白，其中，所述S蛋白变体在其S1结构域和S2结构域之间不包含弗林蛋白酶识别位点；

优选地，与野生型S蛋白相比，所述S蛋白变体在相应于如下位置的氨基酸位置中的一处或多处(例如1处，2处或3处)包含氨基酸置换，所述如下位置参考野生型S蛋白所示的氨基酸位置：668、669、671；

优选地，所述S蛋白变体包含选自下列的1个或几个(例如1个，2个或3个)氨基酸置换：在相应于野生型S蛋白的位置668的位置上的氨基酸置换为A，在相应于野生型S蛋白的位置669的位置上的氨基酸置换为G，在相应于野生型S蛋白的位置671的位置上的氨基酸置换为G；

优选地，与野生型S蛋白相比，所述S蛋白变体在与野生型S蛋白的第668-671位相对应的位置上的氨基酸残基被置换为AGAG。

4.权利要求1-3任一项所述的融合蛋白，其中与野生型S蛋白相比，所述S蛋白变体在与野生型S蛋白的第972位和/或第973位相对应的位置上包含氨基酸置换；

优选地，所述S蛋白变体包含：在相应于野生型S蛋白的位置972的位置上的氨基酸置换为P，和/或在相应于野生型S蛋白的位置973的位置上的氨基酸置换为P。

5.权利要求1-4任一项所述的融合蛋白，其中，所述S蛋白包含如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列；

优选地，所述S蛋白变体包含如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。

6.权利要求1-5任一项所述的融合蛋白，其中，所述融合蛋白从N端至C端包含所述S蛋白或其变体的序列和三聚化结构域序列。

7.权利要求1-6任一项所述的融合蛋白，其中，所述融合蛋白在所述S蛋白或其变体序列和三聚化结构域序列之间进一步包含蛋白酶识别位点序列；

优选地，所述蛋白酶是凝血酶；

优选地，所述蛋白酶识别位点序列包含如SEQ ID NO:4或5所示的序列。

8.权利要求1-7任一项所述的融合蛋白，其中，所述融合蛋白包含选自下列的氨基酸序列：

(1)由SEQ ID NO:6所示序列的第1位至第1238位氨基酸残基构成的氨基酸序列；

(2)由SEQ ID NO:8所示序列的第1位至第1238位氨基酸残基构成的氨基酸序列。