[发明专利]一种合成帕瑞肽的方法

说明书

本发明涉及多肽药物合成技术领域，公开一种帕瑞肽合成方法。包括以下步骤：采用固相合成的方法以及Fmoc保护策略，以2‑CTC Resin为树脂载体，以Fmoc‑Phe‑OH为起始氨基酸，依次连接五个氨基酸，酸解后得到全保护的六肽片段：HO‑Phe‑Tyr(Bzl)‑Lys(Boc)‑D‑Trp‑‑Phg‑(4‑Boc‑NH‑C₂H₄‑NH‑CO‑O)‑Pro‑H。在液相条件下环合、酸解脱去保护基团，即得到帕瑞肽粗品，经制备液相纯化，得到纯度为98.07％帕瑞肽纯品，产率约80.79％。本发明简化了合成工艺，具有纯度高、收率高的优点。

技术领域

本发明涉及多肽药物合成技术领域，特别涉及一种帕瑞肽的制备方法。

背景技术

帕瑞肽(Pasireotide)是由瑞士诺华制药(Novartis)有限公司研制的新一代多受体靶点可注射环状六肽生长抑素类似物药物。

结构式：

分子式：C₅₈H₆₆N₁₀O₉

帕瑞肽体内代谢稳定，在血浆中的半衰期接近12h，与SSTR_1,2,3和SSTR₅都有高亲和性且SSTR₅SSTR₂SSTR₃SSTR₁，帕西瑞肽结合并激活SSTR₅导致ACTH分泌和GH分泌受到抑制，从而起到治疗库欣病和肢端肥大症的作用。与上一代生长抑素类似物经典药物奥曲肽相比，帕瑞肽与SSTR₁、SSTR₃、SSTR₅受体亚型亲和力约为前者的30倍、11倍和158倍，与SSTR₂受体亚型亲和力与前者类似，治疗效果得到显著提高。

2012年4月欧洲委员会批准帕瑞肽在欧洲的上市申请，同年12月该药获得美国FDA上市批准，用于无法手术或手术治疗失败的成人库欣病患者的治疗，是首个用于治疗库欣病的孤儿药。

诺华公司进一步研发了帕瑞肽的长效缓释剂型Pasireotide LAR，体内半衰期大幅提高，仅需每月注射一次。长效帕瑞肽在生物化学性质上表现出优越的性质，具有良好的耐受性与安全性。目前，长效帕瑞肽已经被欧洲药品管理局(EMA)和美国食品和药物管理局(FDA)批准用于治疗肢端肥大症。

目前，帕瑞肽的合成多采用固相合成法。和液相合成法相比较，固相合成具有操作方便、工艺简单、选择性高、副反应少、收率高等优点。诺华制药(Novartis)公司申请的液相合成专利WO 2005/014624中，以H-Lys(Boc)-OMe为起始氨基酸，依次与Z-D-Trp-OH、Z-Phg-OH,(2S,4R)-4-(Boc-NH-CH₂-CH₂-NH-CO-O)-Z-Pro-OH,Z-Phe-OH,Fmoc-Tyr-(Bzl)-OH缩合，环合后得到线性六肽化合物，脱保护后得到目标产物帕瑞肽粗品。该路线反应周期长，收率较低。为缩短液相合成帕瑞肽的合成周期，本课题组陈淼等申请的专利CN 106188231采用了汇聚式合成路线，能够减少反应时间，降低成本，适合工业化大规模生产。但是合成中需要对中间体进行纯化，工作量大，纯度和收率仍不高。

为进一步提高反应效率，我们尝试通过固相合成的方法合成帕瑞肽，以下将对现有固相合成路线进行简要介绍：

诺华公司持有的专利US 20110166320报道的固合成路线中，使用SASRIN Resin作为树脂载体，解离环化得到帕瑞肽粗品，该专利对6种氨基酸缩合顺序均作出了权利要求。然而SASRIN Resin相对于2-CTC Resin价格昂贵，且2-CTC Resine可经氯化亚砜活化再利用，优势明显。