[发明专利]一种番茄品系间耐低钾性差异的鉴定方法

权利要求书

1.本发明提供一种番茄品系间耐低钾性差异的鉴定方法，其步骤如下：

（1）取待测番茄品系，选择其中无病虫植株，置于全营养液（K⁺）及无钾营养液（K^-）中培养；

（2）测量H₂O₂含量，取上述步骤（1）培养的植株叶片1g-2g，剪碎后加3ml 4℃预冷丙酮匀浆，10min （10000r/min）离心后留取上清液，加3ml萃取剂，再加5-10ml蒸馏水，混匀后离心1min（4000r/min）, 上清液为H₂O₂待测液；

（3）取上述步骤（2）中待测液，加入硫酸钛溶液2ml与浓氨水3ml溶液，待沉淀形成后离心10min（3000r/min），弃去上清液，沉淀用丙酮反复洗涤3-5次；

（4）向上述步骤（3）中沉淀加入2mol/L硫酸，待沉淀溶解后，转入10ml容量瓶中，用蒸馏水冲洗离心管，将洗涤液合并后定容至10ml刻度，△A 415nm波长下比色；

（5）制作H₂O₂标准曲线，△A 415nm波长下比色，获得H₂O₂浓度，根据计算公式计算植物组织中H₂O₂含量（μmol/g FW）=（C*Vt）/（FW*V1），K⁺、K^-每组取3-5次重复，取平均值；式中C—标准曲线上查得样品中H₂O₂浓度（μmol）；Vt—样品提取液总体积（ml）；FW—植物组织鲜重（g）；V1—测定时用样品提取液体积（ml）；

（6）分析结果，根据每种番茄品系叶片中相对H₂O₂含量（K^--K⁺）值的大小，判定其耐低钾能力的强弱，数值越小，耐低钾性越强；数值越大，耐低钾性越弱。

2.根据权利要求1所述的一种番茄品系间耐低钾性差异的鉴定方法，其特征在于，所述步骤（1）中全营养液（K⁺）组配方按1-3mM Ca(NO₃)₂·4H₂O，3-5mM KNO₃，0.5-1mM NH₄H₂PO₄，1-3mM MgSO₄·7H₂O，0.03-0.07mM H₃BO₃，0.005-0.01mM MnSO₄·4H₂O，0.5-1mM ZnSO₄·7H₂O，0.2-0.5mM CuSO₄·5H₂O，0.1-0.2mM(NH₄)2MoO₄，0.05-0.1mM FeSO₄·7H₂O和0.04-0.05mMNa2-EDTA配制；无钾营养液（K^-）组去掉配方中KNO₃，用NaNO₃补齐溶液中缺乏的NO₃^-同时达到低钾效果，将pH调节至5.8±0.1。

3.根据权利要求1所述的一种番茄品系间耐低钾性差异的鉴定方法，其特征在于，所述步骤（2）中取培养12h-24h植株叶片，萃取剂配置方法按CHCl3（三氯甲烷）：CCl4（四氯化碳）=1:3体积比混匀。

4.根据权利要求1所述的一种番茄品系间耐低钾性差异的鉴定方法，其特征在于，所述步骤（3）中加入5%-10%硫酸钛溶液。

5.根据权利要求1所述的一种番茄品系间耐低钾性差异的鉴定方法，其特征在于，所述步骤（4）中加入硫酸3ml-6ml，直至沉淀全部溶解。