[发明专利]凡纳滨对虾雌性DNA标签序列和引物及其在性别鉴定中应用有效
| 申请号: | 202110209165.X | 申请日: | 2021-02-24 |
| 公开(公告)号: | CN112746116B | 公开(公告)日: | 2023-01-17 |
| 发明(设计)人: | 于洋;王悦;李富花 | 申请(专利权)人: | 中国科学院海洋研究所 |
| 主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12Q1/6879;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司: | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人: | 马驰 |
| 地址: | 266071 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 凡纳滨 对虾 雌性 dna 标签 序列 引物 及其 性别 鉴定 应用 | ||
1.一种凡纳滨对虾雌性DNA标签序列在凡纳滨对虾遗传性别鉴定中的应用,其特征在于:所述凡纳滨对虾雌性DNA标签序列为SEQ ID No .1所示,使用正向引物LvSDPF:ACGTAAGCCAAGAGAGGGAA,反向引物LvSDPR: TCAAGATGGCTGGCTTTGTTG,使用非高保真Taq酶通过PCR扩增凡纳滨对虾DNA,扩增产物使用琼脂糖凝胶电泳进行分析,如果在470bp位置出现单一条带,则该个体为雌性,如果在470bp位置处没有条带,则为雄性。
2.根据权利要求1所述的遗传性别鉴定的应用,其具体过程为:
(1)取凡纳滨对虾的附肢和/或肌肉,并做好标记;
(2)对所取的附肢和/或肌肉进行DNA提取,获得DNA模板,之后使用如下体系对每个个体的DNA进行PCR扩增:12.5 μl 10×PCR扩增 缓冲液, 0.5 μl 正向引物LvSDPF,0.5 μl反向引物LvSDPR,0.25 μl 普通Taq酶, 2 μl DNA模板,9.75μl 超纯水;扩增程序为:94℃ 5分钟,之后94℃ 30 秒,60℃ 30 秒, 72℃ 30秒,共计35个循环,最后72℃延伸10分钟;
(3)对扩增的PCR产物使用琼脂糖电泳进行检测,如果在扩增片段大小为470bp位置出现单一条带,则判别该个体为雌性;如果没有扩增条带,则该个体为雄性。
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