[发明专利]基于可视化多色电化学发光技术快速检测沙门氏菌的方法

说明书

本发明公开了多色传感器及其应用。本发明还公开基于可视化多色电化学发光技术快速检测沙门氏菌的方法，通过沙门氏菌免疫磁珠特异性识别并捕获沙门氏菌，孵育形成复合物，再利用ITO双极电极联用电致化学发光技术检测得到沙门氏菌浓度与颜色变化的关系，最终确定待测样品中沙门氏菌的浓度。本方法不需要预增菌，电极片上无需固定修饰，直接滴加免疫磁珠‑沙门氏菌复合物即可，检测时间仅需0.5 h，检测限低至10 CFU/mL；利用免疫磁分离技术捕获沙门氏菌，随着ITO双极电极阴极端菌浓度的增加，双极电极阳极端发光颜色由红色变为黄色再到绿色，用时短，颜色变化明显，可肉眼检测，灵敏度高，操作简便，检测成本低且特异性好的优点。

技术领域

本发明属涉及生物传感技术领域，尤其涉及基于可视化多色电化学发光技术快速检测沙门氏菌的方法。

背景技术

“民以食为天，食以安为先”，在全国各级食药监部门高度重视食品安全，不断加大食品安全监督抽检力度的大环境下，我国食品安全得到有力保障，但由沙门氏菌引起的食物中毒事件依然情况严峻。因此，在传统食源性疾病爆发事件中，快速、溯源引起疾病暴发的生物致病性食品并对食源性致病菌进行高效鉴定，对食品安全有重要意义。

平板计数法是行业内检测沙门氏菌的“金标准”，其包括预富集、选择性富集、分离和生化鉴定，操作步骤比较繁琐，依赖人员的感官经验，对工作人员和实验环境都具有较高的要求，检测周期长，一般需要4-7d才能确定检测结果，时效性相较于其他方法存在劣势。而其他主流各种快速检测技术可分为两类；一类是分子生物学方法：包括聚合酶链式反应(PCR)，环介导等温扩增(LAMP)和生物传感器检测法；另一类是免疫学法：如酶联免疫吸附试验(ELISA)，侧向流动免疫分析(LIFA)和免疫传感器。即使“金标准”平板计数法和分子生物学方法都具有很高的灵敏度和特异性，但为此付出的是更长的检测时间、专业的研究人员、复杂的操作和精密的仪器，使得这些方法无法适用于现场快速检测应用。而后者方便、成本低廉，但缺乏现场快速检测所需的准确性和特异性。本方法将能快速分离待测目标的免疫传感器与电致变色传感器结合，快速、经济、准确、独特的光学信号转换能力的糅合，得到一种在复杂食品基质中能快速、准确、全面分析的强有力的快速检测方法。