[发明专利]一种可电离脂质分子及其制备方法及其在制备脂质纳米颗粒的应用

权利要求书

1.一种可电离脂质分子，其特征在于，为如下化学结构：

2.一种可电离脂质分子的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一，在以DCM为溶剂混合有

的混合液中添加DMAP和TEA；再在溶液中添加EDCI，搅拌反应；待检测显示反应完成后，经过萃取、清洗、干燥、浓缩、纯化后得到呈黄色油状的

步骤二，在以DMF为溶剂混合有的溶液中添加Cs₂CO₃，搅拌反应待检测显示反应完成后，经过萃取、清洗、干燥、浓缩、纯化后得到白色固体形式的

步骤三，在THF、乙醇和

的混合液中添加0℃以下的NaBH₄，搅拌反应待检测显示反应完成后，经过萃取、清洗、干燥、浓缩后得到得到白色固体形式的

步骤四，将和EDCI在吡啶溶液中搅拌反应，待检测显示反应完成后，经过萃取、清洗、干燥、浓缩、纯化后得到无色油状可电离脂质分子

3.根据权利要求2所述的一种可电离脂质分子的制备方法，其特征在于，检测显示反应完成的方法为TLC硅胶板薄层色谱。

4.一种可电离脂质分子在制备脂质纳米颗粒的应用，其特征在于，包括：可电离脂质分子与磷脂、胆固醇、聚乙二醇通过合成获得LNP脂质体纳米颗粒，所述LNP能提高负载物-mRNA-在细胞内的翻译表达水平。

5.根据权利要求4所述的一种可电离脂质分子在制备脂质纳米颗粒的应用，其特征在于，所述磷脂为DSPC或者DOPE。

6.根据权利要求4所述的一种可电离脂质分子在制备脂质纳米颗粒的应用，其特征在于，所述聚乙二醇以DMG-PEG2000的形式提供。

7.根据权利要求4所述的一种可电离脂质分子在制备脂质纳米颗粒的应用，其特征在于，合成新型载体LNP的配方按照摩尔百分比为：

胆固醇：磷脂：聚乙二醇＝20-70％：20-60％：2-20％：0.1-5％。

8.根据权利要求6所述的一种可电离脂质分子在制备脂质纳米颗粒的应用，其特征在于，合成新型载体LNP的配方按照摩尔百分比为：

胆固醇：DSPC：DMG-PEG2000＝31.5％：

56％：10％：2.5％。

9.根据权利要求4所述的一种可电离脂质分子在制备脂质纳米颗粒的应用，其特征在于，可电离脂质分子与磷脂、胆固醇、聚乙二醇通过微流控合成方法获得LNP。

10.根据权利要求9所述的一种可电离脂质分子在制备脂质纳米颗粒的应用，其特征在于，所述微流控合成方法包括如下步骤：

准备可电离脂质分子与磷脂、胆固醇、聚乙二醇的混合液；

准备mRNA稀释液；

用微流控合成仪器，以及用原厂提供的微流控芯片制备LNP：一侧注射器装入mRNA稀释液，另一侧注射器装入混合液，设置参数后，重复几次，用完所有的混合液，收集所有的产物LNP溶液，并在30分钟内加入柠檬酸缓冲液稀释至溶液中乙醇比例小于0.5％。

11.根据权利要求10所述的一种可电离脂质分子在制备脂质纳米颗粒的应用，其特征在于，所述微流控合成方法还包括：通过切向流过滤纯化制备得到LNP。