[发明专利]杂色曲霉在制备单宁酶和降解单宁中的应用

说明书

本发明属于单宁降解技术领域，具体涉及一种杂色曲霉在制备单宁酶和降解单宁中的应用。针对目前单宁酶产量低、降解单宁产鞣花酸无法工业化生产的问题，本发明提供了一种杂色曲霉或其菌剂在制备单宁酶和降解单宁中的应用。本发明还同时给出了上述杂色曲霉或其菌剂降解单宁的方法，步骤为：将上述杂色曲霉和/或上述菌剂与含有单宁的样品进行发酵。本发明提供的杂色曲霉能够高效生产单宁酶，且酶解反应的条件具有广泛的pH适应性，从而能够在短时间内高效催化单宁的降解，能够有效提高经济效益。

技术领域

本发明属于单宁降解技术领域，具体地，涉及一种杂色曲霉在制备单宁酶和降解单宁中的应用。

背景技术

单宁酶广泛存在于微生物、植物、动物体内，用以水解大分子单宁等。单宁酶的应用广泛，在食品工业中最为突出，其可用于除去天然食品中因单宁而引起的苦涩味，啤酒和果汁的澄清、防止果酒和果汁中酚类引起的变质、咖啡风味的软饮料生产、麦芽多酚的稳定处理、葡萄酒风味的改进以及作为测定天然没食子酸酯类结构的一种灵敏的分析探针。

鞣花单宁在单宁酶作用下酶解生成的产物鞣花酸，属多酚二内酯，具备抗氧化、抗病毒、抗癌等作用，目前已广泛应用于食品、医疗及制药行业。鞣花酸广泛存在于植物各组织中，但游离形式存在的鞣花酸含量极低，需要将植物进行生物酶解后才能够获得利用价值高的鞣花酸。讲解单宁产鞣花酸成为目前获取鞣花酸的主要途径。但是，单宁酶的来源较为匮乏，受到野生菌株本身单宁酶产量低、酶活低、酶解机制复杂的限制，目前生物降解单宁生产鞣花酸还无法有效的实现工业化生产。因此，开发能够产生单宁酶进而降解单宁产鞣花酸的微生物菌种是目前亟待解决的问题。

发明内容

本发明要解决的技术问题为：单宁酶产量低、降解单宁产鞣花酸无法工业化生产，需要开发产单宁酶的微生物的问题。

本发明解决上述技术问题的技术方案为：提供了一种杂色曲霉或其菌剂在制备单宁酶和/或降解单宁中的应用。

进一步的，上述应用中，所述菌剂为含有杂色曲霉的菌剂。

进一步的，上述应用中，所述菌剂含有杂色曲霉的活菌体、死菌体或发酵清液中的至少一种。

其中，所述发酵清液的制备方法为：将杂色曲霉进行发酵培养得到发酵液，发酵液固液分离得到发酵清液；所述固液分离采用离心分离的方式，离心转速为3000～4000rpm，时间为30～45min，温度为15～20℃；所述发酵培养接种量为1×10⁵～1×10⁶CFU/mL，转速为100～120rpm，温度为25～35℃，时间为50～80h。

本发明第二方面还提供了一种上述杂色曲霉或其菌剂降解单宁的方法，包括以下步骤：将杂色曲霉或其菌剂与含有单宁的样品进行发酵。

其中，所述发酵时的条件为：pH为3～6、温度为25～40℃、转速为100～120rpm、时间为24～72h；所述发酵清液与样品的体积比为2～3︰1～4。

进一步的，所述含有单宁的样品中单宁含量为15～20g/L。

本发明的有益效果为：

本发明通过大量试验，创造性的发现了杂色曲霉能够产生单宁酶并能够发酵单宁，因此提供了一种杂色曲霉在制备单宁酶和降解单宁中的新应用。本发明的杂色曲霉在制备单宁酶和降解单宁中具有很好的效果，经发酵培养得到的发酵清液中单宁酶的酶活性较高，对鞣花单宁的特异性转化能力强，本发明的菌株鞣花酸产率最高为67.4%，具有很好的应用价值。本发明的杂色曲霉中的单宁酶对鞣花单宁进行酶解的步骤简便，具有广泛的pH和温度的耐受性，酶解效率高。

附图说明

图1是本发明中的筛选过程中杂色曲霉在初筛培养基上形成的透明圈。

具体实施方式

本发明提供了一种杂色曲霉或其菌剂在制备单宁酶和/或降解单宁中的应用。