[发明专利]一种利用动物源生物膜制备的口腔修复膜及其制备方法

权利要求书

1.一种利用动物源生物膜制备的口腔修复膜的制备方法，其特征在于：该口腔修复膜为采用动物源生物膜作为原材料，直接进行清洗、裁剪、去病毒、脱脂、脱蛋白、脱细胞后冻干形成的胶原蛋白膜制备而成；所述动物源生物膜原材料为猪小肠；具体制备步骤如下：

（1）清洗：将冷冻的动物源生物膜原材料在常温下化冻，清洗；

（2）裁剪：将清洗后的动物源生物膜原材料裁剪成小段，使用纯化水反复冲洗，直至没有明显油脂；

（3）去病毒：配制NaOH溶液，将裁剪冲洗完的动物源生物膜原材料倒入配制好的NaOH溶液中，搅拌，浸泡，完成后捞出，并使用超声震荡清洗，至清洗液pH为中性；

（4）脱脂：配制三氯甲烷-甲醇混合溶液，将去病毒后的动物源生物膜原材料倒入混合溶液中，搅拌、超声震荡，完成后捞出，使用真空干燥箱真空脱除残留的三氯甲烷和甲醇；所述脱脂配制的三氯甲烷-甲醇混合溶液，三氯甲烷与甲醇的混合体积比为2～3:1；超声震荡时间为24～48h；真空干燥的时间为10～24h；

（5）脱蛋白：配制十二烷基硫酸钠溶液，将脱脂后的动物源生物膜原材料倒入到十二烷基硫酸钠溶液中，搅拌、浸泡，完成后捞出，使用超声震荡清洗脱除十二烷基硫酸钠溶液残留；

（6）二次去病毒：配制NaOH溶液，将脱蛋白后的动物源生物膜原材料再次倒入NaOH溶液中，搅拌，浸泡，完成后捞出，用超声震荡清洗至清洗液pH为中性；

（7）脱细胞：配制双氧水溶液，将二次去病毒后的动物源生物膜原材料倒入双氧水溶液中，搅拌，浸泡，完成后捞出，使用超声震荡清洗去除残留的双氧水溶液；

（8）冻干：将脱细胞后的动物源生物膜原材料使用冻干机进行冻干；

（9）二次裁剪：将冻干后的生物膜按照产品所需规格裁剪成对应所需的尺寸；

（10）包装：将二次裁剪后的生物膜装入包装袋，塑封；

（11）辐照灭菌：将包装好的产品进行辐照灭菌，即得到口腔修复膜成品；

该口腔修复膜制备方法还包括铺膜和挤压步骤；所述铺膜为脱细胞后，将生物膜横竖交错叠加平铺于压板上，并根据不同规格平铺不同的层数，铺完后用微轮针在膜上扎出密度为8～10个/cm²的微孔；所述挤压步骤为将生物膜平铺于压板之后，用挤压机挤压，加强膜与膜之间的贴合度。

2.根据权利要求1所述的利用动物源生物膜制备的口腔修复膜的制备方法，其特征在于：步骤（2）中，所述裁剪成小段的长度为10～20cm。

3.根据权利要求1所述的利用动物源生物膜制备的口腔修复膜的制备方法，其特征在于：步骤（3）和步骤（6）中，所述去病毒及二次去病毒配制的NaOH溶液浓度均为1～3mol/L；浸泡时间为1～4h；所述超声震荡清洗均为超声震荡30min，然后用纯化水清洗10min，且重复清洗10～20次。

4.根据权利要求1所述的利用动物源生物膜制备的口腔修复膜的制备方法，其特征在于：步骤（5）中，所述脱蛋白配制的十二烷基硫酸钠溶液浓度为0.2～1%；浸泡时间为4～6h；所述超声震荡清洗为使用纯化水超声震荡清洗3～5h，且每隔30min捞出用纯化水清洗10min，脱除SDS溶液残留。

5.根据权利要求1所述的利用动物源生物膜制备的口腔修复膜的制备方法，其特征在于：步骤（7）中，所述脱细胞配制的双氧水溶液浓度为5～10%；浸泡时间为2～4h；所述超声震荡清洗为使用注射用水超声震荡清洗2h，且每30min更换一次注射用水。

6.根据权利要求1所述的利用动物源生物膜制备的口腔修复膜的制备方法，其特征在于：步骤（8）中，所述冻干操作为：先于-20℃下预冻16h；然后在压力为0.34Mpa、温度为-60℃条件下，冻干48h。