[发明专利]突变的腺相关病毒衣壳蛋白、包含该蛋白的AAV颗粒和肝定向AAV载体基因治疗

权利要求书

1.一种突变的腺相关病毒(AAV)衣壳蛋白或其片段，其中插入物被插入在具有对应于AAV 2型衣壳蛋白的SEQ ID No.2或其他AAV血清型的同源衣壳蛋白(即AAV1、AAV3b、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAV10、AAV11型和AAV牛型)的氨基酸编号139、161、261、381、447、453、459、534、570、573、584、585、586、587、588、589中至少一个氨基酸之后，所述插入物包含至少四个氨基酸至最多三十个氨基酸的寡肽，如由五至十二个氨基酸、特别是七个氨基酸组成的寡肽，所述插入物可任选地在所述寡肽两端处进一步具有代表接头序列的氨基酸，如果存在，所述接头序列彼此独立地具有1至3个氨基酸的大小；其中所述突变AAV衣壳蛋白或其片段或其同源物在靶向肝组织、肝细胞、肝脏细胞和细胞系、或肝细胞癌(HCC)方面更有效，具有更高特异性。

2.根据权利要求1所述的突变AAV衣壳蛋白、其片段或其同源物，其中所述AAV为1、2、3b、5、6、7、8、9、10、4、11型和牛型。

3.根据权利要求1所述的突变AAV衣壳蛋白、其片段或其同源物，其中所述插入物位于SEQ ID No.2的261、453、534、570、573、587和588中的至少一个氨基酸之后的位置、更优选453和587、特别地优选587的氨基酸。

4.根据前述权利要求中任一项所述的突变AAV衣壳蛋白、其片段或其同源物，其中所述插入物被插入在SEQ ID No.2的aa 587之后，所述插入物具有7个氨基酸的寡核苷酸和在两端的1至3个氨基酸的接头序列。

5.根据前述权利要求中任一项所述的突变AAV衣壳蛋白、其片段或其同源物，其中所述插入物为SEQ ID No.13至21和276至284的序列。

6.根据前述权利要求中任一项所述的突变AAV衣壳蛋白、其片段或其同源物，其中所述突变AAV衣壳蛋白、其片段或其同源物包括选自单点突变、中间或末端删除、二次插入和替换中的至少一种的进一步突变。

7.根据前述权利要求中任一项所述的突变AAV衣壳蛋白、其片段或其同源物，当所述接头序列为含有氨基酸G、S和/或A或由氨基酸G、S和/或A组成的氨基酸序列时，特别地，其中所述接头由氨基酸A或S中的至少一个组成，特别地，具有氨基酸AAA N-末端和AA C-末端，或ASA N-末端和AA C-末端，在至少四至至多三十个氨基酸、如至少五个氨基酸至至多十二个氨基酸、如七个氨基酸的寡肽的两侧。

8.根据前述权利要求中任一项所述的突变AAV衣壳蛋白、其片段或其同源物，其中具有七个氨基酸大小的寡肽是根据SEQ ID No.13至275中的任一个的序列。

9.根据前述权利要求中任一项所述的突变AAV衣壳蛋白、其片段或其同源物，其中所述插入物为SEQ ID No.276至538中的任一个。

10.一种突变的腺相关病毒(AAV)颗粒，其包括根据权利要求1至9中任一项所述的突变AAV衣壳蛋白、其片段或其同源物。

11.根据权利要求1至9中任一项所述的编码突变AAV衣壳蛋白的核酸分子、其片段或其同源物。

12.一种核酸载体，特别地，一种包括根据权利要求11所述核酸分子的质粒。

13.一种宿主细胞，其含有根据权利要求12所述核酸载体或根据权利要求11所述的核酸分子。

14.一种根据权利要求10所述的AAV颗粒或根据权利要求11所述的核酸分子或根据权利要求12所述的核酸载体在制造AAV颗粒或在制造用于基因治疗的药物中的用途。