[发明专利]HTT阻遏物及其应用

说明书

本文公开了HTT阻遏物以及使用该HTT阻遏物的方法和组合物。本文公开了用于诊断、预防和/或治疗亨廷顿氏病的方法和组合物。特别地，本文提供了用于修饰(例如调节表达)HD HTT等位基因以预防或治疗亨廷顿氏病的方法和组合物，其包含mHTT阻遏物(其阻遏mHTT转录物并因此也阻遏mHTT蛋白表达)。

相关申请的交叉引用

本申请要求2019年1月15日提交的美国临时申请第62/792,701号的权益，其公开通过引用其全文纳入本文。

序列表

本申请包含以ASCII格式电子提交的序列表并通过引用其全部内容纳入本文。所述ASCII拷贝创建于2020年1月3日，命名为8327-018740_SL.txt，并且大小为22,157字节。

技术领域

本公开涉及诊断和治疗亨廷顿氏病的领域。

背景技术

亨廷顿氏病(HD)，也称为亨廷顿氏舞蹈病(Huntington’s Chorea)，是一种运动、认知和精神障碍的进行性紊乱。该疾病发作的平均年龄是35-44岁，但在约10％的情况中，发作在21岁之前发生，并且疾病诊断后的平均寿命是15-18年。患病率是每100,000西欧血统人约3-7人。

亨廷顿氏病是在九十年代早期首个表征的三核苷酸重复序列扩增病症的示例(参见Di Prospero和Fischbeck(2005)Nature Reviews Genetics6:756-765)。这些病症涉及3个核苷酸组不稳定重复序列的局部扩增并可能会导致其中保留扩增的重复序列的基因的功能丧失、获得毒性功能或两者。三核苷酸重复序列可位于基因的任何部分，包括非编码和编码基因区。位于编码区内的重复序列通常涉及重复的谷氨酰胺编码三联体(CAG)或丙氨酸编码三联体(CGA)。非编码序列内的扩增的重复序列区域可能会导致基因的异常表达，而编码区内的扩增的重复序列(也称作密码子重复病症(codon reiteration disorder))可能会导致错误折叠和蛋白质聚集。与异常蛋白质相关的病理生理的确切原因常常是未知的。通常，在经历三核苷酸扩增的野生型基因中，这些区域在正常群体中包含可变数量的重复序列，但在患病群体中，重复序列的数量可以从倍增增加到重复序列数量的对数级增加。在HD中，重复序列被插入编码大胞质蛋白亨廷顿蛋白(HTT)的基因的N末端编码区。正常的HTT等位基因包含15-24个CAG重复序列(SEQ ID NO:23中所公开的“CAG”重复序列)，而包含36个或更多个重复序列的等位基因有可能被认为是潜在的HD致病等位基因并且增加患此疾病的风险。包含36-39个重复序列的等位基因被认为是不完全外显(penetrant)的，并且具有这些等位基因的个体可能或可能不发展出疾病(或在以后的生活中可能发展出症状)，而包含40个重复序列或更多个重复序列的等位基因被认为是完全外显的。事实上，从没有包含具有如此之多个重复序列的HD等位基因的人被报道为无症状者。常常发现具有青少年HD发作(年龄21岁)的那些个体具有60或更多个CAG重复序列。除了CAG重复序列的增加以外，还已经证明HD可涉及重复序列内的+1和+2个移码，因此该区域将编码多聚丝氨酸多肽(在+1移码的情况下，由AGC重复序列编码)踪迹，而不是多聚谷氨酰胺(Davies和Rubinsztein(2006)Journal of Medical Genetics43:893-896)。在HD中，突变的HTT(mHTT)等位基因通常遗传自一个亲本，作为显性性状。如果另一个亲本不患该疾病，则HD患者的任何子女都有50％的可能性发展出疾病。在一些情况中，亲本可能有中间HD等位基因并且可能是无症状的，但是由于重复序列扩增，子女显示出该疾病。此外，HD等位基因还可以显示出一种预知现象，其中由于精子发生过程中重复序列区域的不稳定性质，在数代人中观察到严重性增加或发病年龄降低。