[发明专利]一种利用脂肪酶修复邻苯二甲酸酯污染土壤的方法

权利要求书

1.一种修复邻苯二甲酸酯污染土壤的方法，其特征在于所述方法为：将脂肪酶加入邻苯二甲酸酯污染土壤中，调节土壤pH5.5-8.5、质量含水量15-45％，20-50℃条件下恒温培养，降解土壤中邻苯二甲酸酯；所述邻苯二甲酸酯为邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二异丁酯或邻苯二甲酸二正丁酯中的一种；所述脂肪酶为源自假丝酵母菌(Candida sp.)的脂肪酶EC3.1.1.3；所述脂肪酶加入量为0.5-10U/g土壤；

所述脂肪酶为固定化脂肪酶，所述固定化脂肪酶按如下方法制备：将脂肪酶加入pH为6-8的磷酸盐缓冲液中制成脂肪酶溶液，再加入生物炭，搅拌均匀，在温度为30-50℃，转速为100-200rpm的恒温振荡培养箱中固定反应1-9h，抽滤，滤饼干燥，获得固定化脂肪酶；

所述生物炭是以玉米秸秆为原料，首先经过多次去离子水冲洗以去除表面黏附物及灰尘，随后在通风处初步风干，将风干后的玉米秸秆于70-80℃过夜干燥、粉碎，获得玉米秸秆粉末；将玉米秸秆粉末在600℃的马弗炉中炭化6h，冷却至室温后取出，获得生物炭；

所述生物炭为活化后的生物炭，所述活化后的生物炭按如下方法制备：将生物炭研磨，过20-80目筛，得到生物炭粉；将生物炭粉加入质量浓度5％NaOH水溶液中，在室温环境下150rpm磁力搅拌2h，真空抽滤，滤饼在80℃环境下烘干24h；将烘干后的生物炭在氮气流中，以10℃/min的速率升温至600℃并保温2h，去离子水清洗后用0.1M的HCl水溶液洗涤至中性进行中和，最后用去离子水清洗至中性并在60℃烘箱内烘干，得到活化后的生物炭；所述NaOH水溶液体积用量以生物炭粉重量计为10mL/g。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述邻苯二甲酸酯污染土壤中各种邻苯二甲酸酯污染浓度均为0.1-10mg/kg。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述土壤pH首先用质量浓度30％醋酸水溶液和质量浓度10％氧化钙水溶液将PAEs污染的土壤粗调至7.5，然后用100mM磷酸盐缓冲液准确调节pH值为7.5。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述脂肪酶溶液浓度为1-6U/mL，所述脂肪酶溶液体积用量以生物炭重量计为10mL/g。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述氮气流的流速为200mL/min。