[发明专利]用于保存生物样本中核酸的样本保存液及其使用方法在审

专利信息
申请号: 202011580147.4 申请日: 2020-12-28
公开(公告)号: CN112626169A 公开(公告)日: 2021-04-09
发明(设计)人: 张佳斌;邹永龙;曲峰;何宗顺 申请(专利权)人: 苏州白垩纪生物科技有限公司
主分类号: C12Q1/24 分类号: C12Q1/24
代理公司: 北京格允知识产权代理有限公司 11609 代理人: 谭辉
地址: 215002 江苏省苏州市苏州工*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 用于 保存 生物 样本 核酸 及其 使用方法
【权利要求书】:

1.一种用于保存唾液中核酸的样本保存液,所述样本保存液包含:细胞裂解剂、缓冲剂、螯合剂、盐离子、抗微生物剂和核酸保护剂;其中,所述样本保存液包含:

质量体积百分比为0.1-50%的细胞裂解剂,

终浓度为10-500mM的缓冲剂,

终浓度为0.1-200mM的螯合剂,

终浓度为10-1000mM盐离子,

质量体积百分比为0.05-25%的抗微生物剂,和

质量体积百分比为0.05-5%的核酸保护剂。

2.如权利要求1所述的样本保存液,所述样本保存液的pH为5.5-9.5,优选6.0-8.2。

3.如权利要求1或2所述的样本保存液,所述细胞裂解剂为盐酸胍、异硫氰酸胍、硫氰酸钠、硫氰酸钾、碘化钠、碘化钾、高氯酸钠、高氯酸钾、亚硫酸氢钠、亚硫酸氢铵、硫酸铵、尿素、去污剂中的一种或任意几种的组合;其中,所述去污剂为阴离子表面活性剂、非离子表面活性剂、阳离子表面活性剂或两性表面活性剂;和/或

其中,所述缓冲剂为三羟基氨基甲烷、4-羟乙基哌嗪乙磺酸、乙磺酸钠、乙酸钠、柠檬酸、邻苯二甲酸氢钾、硼酸、磷酸二氢钾、碳酸二氢钠、碳酸钠、碳酸氢铵、二乙醇胺、丙磺酸、柠檬酸钠、磷酸二氢钠、乙酸铵、亮氨酸、N,N-二羟乙基甘氨酸、3-(环己胺)-1-丙磺酸、3-吗啉丙磺酸、酒石酸钠、酒石酸中的一种或任意几种的组合;和/或

其中,所述螯合剂为EDTA(乙二胺四乙酸)、NTA(次氮基三乙酸)、水杨酸、三草酸、二亚乙基三胺五乙酸、柠檬酸、N,N'-乙二胺二琥珀酸、邻菲咯啉、酒石酸钾钠、柠檬酸铵、酒石酸、酒石酸钠、三乙醇胺中的一种或任意几种的组合;和/或

其中,所述盐离子为氯化钠、氯化铵、硫酸钠、硫酸铵、氯化钾、碳酸钾、磷酸铵、氯化锂、乙酸钠、碳酸锂、高氯酸钠、碘化钠中的一种或任意几种的组合;和/或

其中,所述抗微生物剂为抗生素、抗病毒剂、抗真菌剂、抑菌剂或抗寄生虫剂中的一种或任意几种的组合;和/或

其中,所述核酸保护剂为氧钒核糖核苷复合物、尿素、儿茶素、茶黄素、花青素、花白素、类黄酮、木酚素、N-乙酰氨基己糖、己糖醛酸中的一种或任意几种的组合。

4.如权利要求3所述的所述样本保存液,其中,

所述细胞裂解液为质量体积百分比5-30%的盐酸胍、10-30%的异硫氰酸胍、5-20%的碘化钠、2-30%的高氯酸钠、5-40%的尿素、0.2-10%的Brij 56、0.2-5%的十二烷基硫酸钠、0.2-2%的辛烷基聚氧乙烯基十二烷基氯化铵、0.2-2%的十四烷基三甲基氯化铵、0.2-1%的十二烷基肌氨酸钠中的一种或任意几种的组合;

和/或

所述缓冲剂为10-400mM的柠檬酸、20-200mM的N,N-二羟乙基甘氨酸、20-200mM酒石酸钠、20-100mM酒石酸中的一种或任意几种的组合;

和/或

所述螯合剂为1-80mM的EDTA、2-50mM柠檬酸、2.5-125mM的柠檬酸钠、2-100mM酒石酸、10-100mM的酒石酸钠中的一种或任意几种的组合;

和/或

所述盐离子为50-500mM的氯化钠、50-500mM的氯化钾、50-500mM的乙酸钠、100-800mM高氯酸钠、100-1000mM的碘化钠;

和/或

所述的抗微生物剂为质量体积百分比0.1-1%的三氯生、0.05-1%的IRGASAN DP 300、0.05-1%的Proclin 950、0.05-0.5%的Proclin 300、0.05-0.5%的Proclin 150、0.05-2%的叠代钠、1-20%的乙醇、2-10%的异丙醇、2-20%聚乙二醇200、2-10%的甘油中的一种或任意几种的组合;

和/或

所述核酸保护剂为质量体积百分比2-5%的尿素、质量体积百分比0.05-2.5%的儿茶素、0.05-2%的花青素、0.1-2%的木酚素、1-5%的N-乙酰氨基己糖中的一种或任意几种的组合;

和/或

所述的唾液样本和样本保存液的体积为1:10-10:1,优选为1:4-4:1,更优选为1:2-2:1,例如1:1。。

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