[发明专利]果糖-二磷酸酶突变体及其在碳水化合物合成中的应用

权利要求书

1. 一种果糖-二磷酸酶突变体，其特征在于，其相对于如SEQ ID NO：1所示氨基酸序列的野生型果糖-二磷酸酶而言，其第104位赖氨酸突变为谷氨酰胺，且第132位精氨酸突变为异亮氨酸。

2.如权利要求1所述的果糖-二磷酸酶突变体，其特征在于，进一步的，其第210位酪氨酸突变为苯丙氨酸，以及第218位赖氨酸突变为谷氨酰胺。

3.如权利要求1至2任一项所述的果糖-二磷酸酶突变体的编码基因。

4. 如权利要求3所述的果糖-二磷酸酶突变体的编码基因，其特征在于，其核苷酸酸序列如SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4所示。

5.含有如权利要求3或4所述基因的表达盒。

6.含有如权利要求3或4所述基因的表达载体。

7.权利要求1或2所述的果糖-二磷酸酶突变体或其编码基因在碳水化合物合成中的应用；所述碳水化合物是6-磷酸果糖或直链淀粉。

8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，以二羟基丙酮为原料，经过羟基丙酮激酶、磷酸丙糖异构酶、果糖-二磷酸醛缩酶以及如权利要求1或2所述的果糖-二磷酸酶突变体的催化反应，转化成6-磷酸果糖。

9. 如权利要求8所述的应用，其特征在于，其反应体系是Hepes缓冲液100 mM，NaCl100 mM，Mg²⁺ 5 mM，Zn²⁺ 10 μM，羟基丙酮激酶0.77 mg/mL，磷酸丙糖异构酶0.33 mg/mL，果糖-二磷酸醛缩酶0.15 mg/mL，EDTA 0.1 mM，腺苷二磷酸1 mM，多聚磷酸 初始为0.4 mM，随后每小时补加0.2 mM，多聚磷酸激酶0.44 mg/mL，化合物1,3-二羟基丙酮 25 mM，以及如权利要求1或2果糖-二磷酸酶突变体 0.3 mg/mL。

10.如权利要求7所述的应用，其特征在于，以二羟基丙酮为原料，经过羟基丙酮激酶、磷酸丙糖异构酶、果糖-二磷酸醛缩酶、葡糖磷酸异构酶、磷酸己糖磷酸变位酶、葡萄糖-1-磷酸腺苷酰基转移酶、淀粉合酶以及如权利要求1或2所述的果糖-二磷酸酶突变体，转化成直链淀粉。