[发明专利]植物中花青素类化合物的液质联用分析方法

权利要求书

1.一种植物中花青素类化合物的液质联用分析方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)确定采用LC-MS/MS检测分析的参数条件，色谱条件：采用反向色谱柱，柱温30℃～35℃，流动相A为含甲酸的水溶液，流动相B为含甲酸的乙腈溶液，采用梯度洗脱方式；

质谱条件：采用正离子模式和MRM扫描模式；

2)制备待测植物样品溶液，按照所述色谱条件和所述质谱条件上机测试；

3)根据花青素类化合物的定性Q1/Q3离子对和保留时间确定待测植物中是否含有花青素类化合物。

2.根据权利要求1所述的植物中花青素类化合物的液质联用分析方法，其特征在于，所述步骤1)中反向色谱柱为BEH C18柱，所述柱温为35℃，所述流动相A为含0.1％～1％甲酸的水溶液，流动相B为含0.1％～1％甲酸的乙腈溶液。

3.根据权利要求2所述的植物中花青素类化合物的液质联用分析方法，其特征在于，所述步骤1)中梯度洗脱程序为：

0min，流动相A与流动相B的体积比为95:5；

6min，流动相A与流动相B的体积比为50:50；

12min，流动相A与流动相B的体积比为5:95；

14min，流动相A与流动相B的体积比5:95；

14.1min，流动相A与流动相B的体积比95:5；

16min，流动相A与流动相B的体积比为95:5。

4.根据权利要求1所述的植物中花青素类化合物的液质联用分析方法，其特征在于，所述质谱条件为：ESI离子源，离子源温度为550℃，气帘气压力为35psi，辅助加热气Gas1压力为50psi，辅助加热气Gas2压力为60psi，碰撞气压力为Medium，MRM监测窗口为65s。

5.根据权利要求1至4任一项所述的植物中花青素类化合物的液质联用分析方法，其特征在于，还包括采用花青素类化合物标准品建立标准曲线法测定所述待测植物中花青素类化合物含量的步骤。

6.根据权利要求1至4任一项所述的植物中花青素类化合物的液质联用分析方法，其特征在于，所述步骤3)中定性Q1/Q3离子对的建立方法包括如下步骤：

根据已知分子结构的花青素类化合物的母核结构以及其母核与葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖等结合形式，推导理论上可形成的花青素类化合物的分子结构及其分子量；

按照权利要求1至4任一项所述的参数条件，对已知花青素类化合物进行LC-MS/MS分析，确定主要裂解碎片信息，计算所述理论上可形成的花青素类化合物的所有理论二级碎片信息，并与母离子组合，推导该检测参数条件下的所有理论Q1/Q3离子对；

根据同类型花青素母核所连接糖类的不同,其保留时间的偏移呈现一定的规律,可根据此规律推测相对应无标品的花青素类化合物的保留时间，并通过化合物结构的裂解规律，确定所述定性Q1/Q3离子对信息。

7.根据权利要求1至4任一项所述的植物中花青素类化合物的液质联用分析方法，其特征在于，所述步骤2)制备待测植物样品溶液包括如下步骤：

将植物样品研磨成粉末，按照重量体积比1：(10～20)加入提取溶剂，所述提取溶剂为含0.05％～0.15％盐酸以及体积比(2～4):(8～6)的水、甲醇的混合溶剂，涡旋后超声提取，离心，收集上清液，即得。

8.根据权利要求7所述的植物中花青素类化合物的液质联用分析方法，其特征在于，所述提取工艺条件为：室温下涡旋提取2～3次，超声提取2～3次，每次5-15min。

9.权利要求1-8任一项所述的植物中花青素类化合物的液质联用分析方法在分析鉴定植物中花青素类物质中的应用。

10.权利要求9所述的应用，其中分析鉴定为定性或定量分析。