[发明专利]家系致病性冠心病易感基因及其体外检测的试剂和应用

说明书

本发明涉及家系致病性冠心病检测技术领域，是一种家系致病性冠心病易感基因及其体外检测的试剂和应用，该家系致病性冠心病易感基因为发生突变的SelS基因，SelS基因的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示，SelS基因发生突变时，其核苷酸序列表第2269位发生可剪切突变。本发明公开了基于冠心病易感基因SelS基因可剪切突变位点而开发的冠心病筛查试剂盒，检测精度和灵敏度高，利用本发明所述试剂盒可以进行冠心病的预测与辅助诊断，对于冠心病的防治具有重要的意义。

技术领域

本发明涉及家系致病性冠心病检测技术领域，是一种家系致病性冠心病易感基因及其体外检测的试剂，还包括所述试剂在制备用于体外检测家系致病性冠心病易感基因的试剂盒中的应用。

背景技术

冠心病(Coronary Artery Disease，CAD)是指冠状动脉血管发生动脉粥样硬化病变，引起血管腔狭窄、阻塞或冠状动脉血管功能性改变即冠状动脉痉挛，造成心肌缺血、缺氧或坏死而导致的心脏病，又称冠状动脉粥样硬化性心脏病。CAD是一种复杂疾病，对CAD病因学、早期诊断、治疗及预防等方面的研究是目前的前沿问题。研究表明家族史是CAD的独立危险因素，遗传变异被认为是该疾病发生的直接诱因之一，因而，亟需从遗传变异角度开展CAD易感基因的研究。

SelS基因是CAD的主要易感基因已被广泛证实，但SelS基因与CAD具体作用机制尚不十分明确，在SelS基因中，任何一个碱基片段、编码蛋白的突变都会影响其在CAD疾病中的生物过程，对SelS基因致病位点或片段的精确定位有利于冠心病防治药物的筛选和研发。而新近研究表明在导致包括冠心病在内的多种人类疾病的突变中，超过90％不在蛋白质编码范围之内。作为基因调控的关键步骤之一,可变剪接广泛存在于真核生物，并参与各种生物过程,包括细胞分化凋亡和细胞程序性死亡，它也在成熟的组织和细胞压力起着重要的作用，多项研究表明，可变剪接异常可导致许多疾病。因此，研究选择性剪接事件的功能对于理解生物系统的多样性和人类疾病的分子生物学机制至关重要。

发明内容

本发明提供了一种家系致病性冠心病易感基因及其体外检测的试剂和应用，克服了上述现有技术之不足，发明人通过对一个冠心病家系进行了全外显子测序及家系连锁分析，发现了SelS基因的一个可剪切突变(IVS3+3AT)，人群中验证后，通过构建细胞模型阐明了该突变对于蛋白翻译产生的影响，为冠心病的防治研究提供了参考。鉴于此，本发明以此突变位点为检测靶点，设计引物，开发了一种SelS基因家系突变检测试剂盒，该试剂盒检测精确，灵敏度高，对冠心病的诊断与防治具有重要的指导意义。

本发明的技术方案之一是通过以下措施来实现的：一种家系致病性冠心病易感基因，该易感基因为发生突变的SelS基因，SelS基因的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示，SelS基因发生突变时，其核苷酸序列表第2269位发生可剪切突变。

本发明的技术方案之二是通过以下措施来实现的：一种体外检测家系致病性冠心病易感基因的试剂，试剂包括引物，引物包括上游引物和下游引物，

上游引物的核苷酸序列：TATCCCAGGCTTTATGAATCGG；

下游引物的核苷酸序列：CAGAACAAACTTCACCCTCGTT。

本发明的技术方案之三是通过以下措施来实现的：一种技术方案之二所述试剂在制备用于体外检测家系致病性冠心病易感基因的试剂盒中的应用。

下面是对上述发明技术方案之三的进一步优化或/和改进：

上述试剂盒为聚合酶链式反应与限制性片段长度多态性分析相结合的试剂或聚合酶链式反应与直接测序法相结合的试剂盒。

上述试剂盒中包含PCR扩增酶及相应缓冲液。