[发明专利]一种多齿β-二酮配体、其发光稀土配合物及应用

说明书

一种多齿β‑二酮配体，其结构如式X所示，式中m、n和k独立地选自1～20的整数，R₁选自氢、羟基、烷氧基、烷基、烯基、炔基、烯氧基、炔氧基、苯基、含有取代基团的苯衍生物或芳香烃基团；R₂、R₃和R₄独立选自烷基、烯基、炔基、苯基、噻吩、含有取代基团的苯衍生物、全氟取代烷基或全氟取代苯基。本发明的多齿β‑二酮配体含有六个羰基，可通过分子内六个羰基与中心稀土离子配位，从而形成稳定的稀土发光配合物，既可增强发光，也可避免表面活性剂、缓冲液等试剂与稀土配合物发生作用而导致的发光淬灭。本发明还将制备的稀土发光配合物应用到免疫检测领域，特别是时间分辨免疫荧光法检测、均相化学发光检测和荧光侧向免疫层析法检测技术中，提高了检测的稳定性和灵敏度。

技术领域

本发明属于免疫检测及分析领域，具体涉及一种多齿β-二酮配体、含有该配体的发光稀土配合物、以及其在免疫检测中的应用。

背景技术

稀土配位化合物简称稀土配合物，是由稀土中心离子及其有机配体络合或螯合而成的化合物。稀土离子丰富的电子能级赋予稀土配合物特殊的光谱性质，例如发光寿命长且发射半峰宽窄，稀土配合物也因此成为颇具潜力的发光材料，在免疫检测领域中发挥着重要的作用。免疫检测技术是一种利用抗原与抗体特异性反应而建立的体外检测方法，其中基于发光稀土配合物的免疫检测方法被广泛开发应用，例如均相化学发光法和荧光侧向免疫层析法、时间分辨免疫荧光法等。所以，稀土发光配合物的研究具有重要的意义和实用价值。

在免疫检测应用中，通常会大量使用表面活性剂、缓冲液等试剂，这些试剂成分会与稀土配合物发生作用，造成发光的淬灭。例如，在免疫检测中经常会使用PB或PBS缓冲液，其中都含有磷酸根离子，而磷酸根离子会与配合物的中心稀土离子(例如铕Eu、铽Tb、钐Sm等)发生强的络合作用，使得发光信号降低甚至完全被淬灭，从而严重影响免疫检测的效果。基于此，亟需开发具有强螯合能力的有机配体，通过其牢固地螯合中心稀土离子形成稀土配合物，以减少外界环境对稀土配合物发光的不利影响。

现有公开的有机配体中，不乏声称其具有强螯合能力的，例如可用于金属离子的结合分离，但这些配体并不适用于构筑发光的稀土配合物，因为这些配体与稀土离子(例如Eu³⁺)螯合后形成的配合物不具有发光性质或很难实现发光。因此，开发具有强螯合能力的有机配体且将其与稀土离子有效地形成发光配合物仍然是一项挑战。

发明内容

本发明提供了一种具有强螯合能力的多齿β-二酮配体，基于该化合物为配体制备了具有高稳定性的稀土发光配合物，并将所制备的稀土发光配合物应用到免疫检测领域，例如时间分辨免疫荧光法、均相化学发光法和荧光侧向免疫层析法，提高了稀土配合物在免疫检测中的发光性能。

在本发明范畴内适用如下定义。

若一个配位体含有两个或两个以上的能提供孤电子对的原子，这种配位体就叫多齿配位体。与金属配位时形成低配位比，环状结构的螯合物，减少甚至消除了分级络合(配位)的现象，配合物稳定性增高。本发明公开了一种多齿β-二酮配体，其含有六个羰基，即可通过分子内六个羰基与中心稀土离子(例如Eu³⁺)配位，从而形成多齿配位。

强螯合能力的有机配体，例如本发明的多齿β-二酮配体，可牢固地螯合中心稀土离子形成稳定的稀土配合物，以减少外界环境对稀土配合物发光的不利影响。有利地，通过多齿β-二酮配体形成稳定的稀土配位是重要的，既可增强发光，也可避免表面活性剂、缓冲液等通常会大量使用的试剂与稀土配合物发生作用，减少发光的淬灭。