[发明专利]一种环状circRNA AFF1及其应用

说明书

本发明属于生物医学检验领域，具体地说，涉及一种用于诊断蛛网膜下腔出血(SAH)的环状circRNA AFF1，还涉及该环状circRNA AFF1在诊断蛛网膜下腔出血(SAH)中的应用以及相关的试剂盒。所述环状RNA circRNA AFF1的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明通过提取外周血血浆中的RNA后，发现circRNA AFF1作为一个重要的生物学检测指标，可应用于定量检测，从而判定患者是否存在SAH风险，实现SAH患者的早诊、早防、早治，在蛛网膜下腔出血(SAH)的早期诊断、鉴别诊断中具有重要作用。

技术领域

本发明属于生物医学检验领域，具体地说，涉及一种用于诊断蛛网膜下腔出血(SAH)的环状circRNA AFF1，还涉及该环状circRNA AFF1在诊断蛛网膜下腔出血(SAH)中的应用以及相关的试剂盒。

背景技术

蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage，SAH)是一种神经系统急症，死亡率为50％。除动脉瘤破裂引起，其余发病原因不清，而发病后再出血的尤其危险。究其原因，均与血管功能异常关系密切。SAH不仅对中枢神经系统造成毁灭性打击，而且对其他多个器官产生严重影响，最常见的并发症是由于脑组织缺血、缺氧造成的神经功能缺失，遗留永久的神经功能障碍。

SAH作为是一种突发性高致死率的神经系统疾病，长期以来其诊断主要依赖于CT等影像学手段，针对该疾病的早期诊断及复发引起的再次出血缺乏有效的诊断手段。因此，深入研究SAH的发生发展过程，寻找关键的分子标志物和药物靶点，对开发有效的诊断、治疗措施具有重要的科学意义和临床价值。

环状RNA(circRNA)是最近几年发现的一类在哺乳动物体内广泛存在的非编码RNA，其表达丰富，是由特殊的末端反向互补的前体mRNA经过可变剪切形成。circRNA首尾相连形成闭合环状结构使其比线性RNA更加稳定，能够耐受核酸外切酶的降解。同时，circRNA的表达具有组织及细胞类型的特异性，并且在血液、唾液、尿液或外泌体中也能检测到丰富的circRNA。circRNA的这些特征表明它具有作为疾病诊断标志物的潜能。

SAH与血管功能异常及由于缺氧造成的血管应激损伤存在密切联系，缺氧状态下血管内皮细胞中CircRNA AFF1存在异常激活，从而导致Hippo/YAP信号通路中的最终效应因子YAP磷酸化水平上调，最终造成血管再生及修复功能部分丧失。通过患者标本的高通量环状RNA测序分析，筛选发现circAFF1在缺氧性血管损伤中异常升高，在影像学表现之前即可扩散进入外周血，具有一定的早期预警的临床意义。

发明内容

基于上述问题，本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种快速、灵敏、特异的蛛网膜下腔出血(SAH)的诊断指标以及相应的诊断试剂盒。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案包括以下几个方面：

在第一个方面，本发明提供了一种环状circRNA AFF1，所述环状RNA circRNAAFF1的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

在第二个方面，本发明提供了一种蛛网膜下腔出血的分子标志物，所述分子标志物为环状circRNA AFF1。

本发明发现蛛网膜下腔出血患者中circAFF1的上调，因此，其可以作为蛛网膜下腔出血的一个重要的生物学检测指标，可应用于定量检测，从而判定患者是否存在SAH风险，实现SAH患者的早诊、早防、早治，在蛛网膜下腔出血(SAH)的早期诊断、鉴别诊断中具有重要作用。

在第三个方面，本发明提供了环状circRNA AFF1定量检测剂在制备蛛网膜下腔出血的诊断试剂盒中的应用。

其中，所述定量检测试剂为能扩增出环状circRNA AFF1的qRT-PCR引物，所述qRT-PCR引物的上游引物的序列如SEQ ID NO.2所示，下游引物的序列如SEQ ID NO.3所示。