[发明专利]一种碱性成纤维细胞生长因子微球及其制备方法

说明书

本发明涉及一种碱性成纤维细胞生长因子微球及其制备方法。本发明提供了一种制备微球的方法，包括以下步骤：提供有机相，所述有机相包含溶解于有机溶剂中的聚己内酯和任选的有机相表面活性剂；提供外水相，所述外水相包含溶解于水中的外水相表面活性剂；提供内水相，所述内水相包含溶解于水中的碱性成纤维细胞生长因子和任选的内水相表面活性剂；由内水相和有机相得到油包水初乳；由油包水初乳和外水相得到水包油包水复乳；使复乳中的有机溶剂挥发，得到微球；以及收集微球。本发明还提供了一种微球，包括外壳和内核，所述外壳包含聚己内酯，所述内核包含碱性成纤维细胞生长因子。

技术领域

本发明涉及一种碱性成纤维细胞生长因子微球及其制备方法。

背景技术

碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)作为一种生理功能非常广泛的细胞生长因子，它对成纤维细胞、血管内皮细胞等均有明显的促细胞分裂作用；能刺激血管生长，加速创伤愈合。因此以bFGF作为原料药的药物被广泛应用于烧伤创面(包括浅II度、深II度、肉芽创面)、慢性创面(包括体表慢性溃疡等)和新鲜创面(包括外伤、供皮区创面、手术伤等)。此外，在包括牙骨、软骨和骨骼等骨的再生过程中，bFGF对相关细胞如软骨细胞和成骨细胞的增殖和迁移以及相关组织如牙骨质和结缔组织的再生同样具有重要影响。同时，bFGF可以通过维持或增加骨缺损部位的间充质干细胞的分化、增值能力，来预防骨质流失并促进骨再生，上述特点使得bFGF具有极大的潜在价值。然而，目前国内上市的bFGF药物多局限于外用创伤领域，且剂型多为如冻干粉、外用溶液以及凝胶等的外用制剂。这些制剂的共同点是它们均需要多次给药，而且疗效持续时间短，而频繁用药也容易降低患者的依从性，大大限制bFGF的成药性和应用前景。

近年来，基于生物材料的控释策略也被广泛研究并应用于创伤修复和骨再生等领域。国内公开的有关bFGF载体制备的专利技术中，大多数生物载体为纳米膜或水凝胶，它们虽然能够起到一定的缓释效果，但实际使用过程仍有一定的缺陷。由于纳米膜装载药物的方式为静电吸附，不能控制bFGF释放过程中的参数，导致批间差异明显、重复性差。同时bFGF暴露于材料表面，不仅增加了储存的难度，还无法保证治疗期间bFGF的生物学活性。同样对于水凝胶，虽然提高了载体的生物相容性并能局部持续释放bFGF，但缓释效率和bFGF稳定性同样无法保证，这将限制治疗的总体功效。因此常规缓释载体的缺陷强调了对新一代缓释载体的需求。

为应对这一需求，国内外许多研究人员着手于微球递送系统的开发，由于其具有稳定、良好的缓释能力，微球被广泛用于控制药物输送以治疗各种疾病。同时，微球在治疗期间可以对药物提供一定程度的酶保护作用，大大增加了其作为载体的适用范围。常用的微球材料是人工合成高分子材料包括聚乳酸(PLA)、聚羟基乙酸(PGA)、聚丙交酯以及PLA和PGA的共聚物(PLGA)等。由于PLGA是FDA最早认证的可用于人体的合成可降解的生物高分子材料之一，目前研制的bFGF微球大多为PLGA微球。虽然PLGA微球有较高的机械强度、对装载的bFGF有一定的保护作用、能够完全降解且降解时间可调控，但PLGA降解后会增加伤口部位的酸度进而影响组织的修复和bFGF的稳定性。不仅如此，部分bFGF在PLGA微球中以吸附作用和PLGA结合，并没有被完全包裹，这就造成了实际释放过程中，PLGA微球有着较大的突释率和较短的释放周期等问题。更为重要的是，PLGA微球的载药量大部分为ng/mg级别，无法长期维持bFGF在缓释过程中的有效浓度，因而多数技术仅仅停留在实验阶段，限制了PLGA微球作为bFGF释放载体在临床中的应用。

仍然需要一种新的碱性成纤维细胞生长因子微球及其制备方法，该微球具有良好的形态、质地、粒径分布，能够缓慢持续释放bFGF，且具有良好的稳定性。

发明内容

本发明的目的是提供一种新的碱性成纤维细胞生长因子微球及其制备方法，该微球具有良好的形态、质地、粒径分布，能够缓慢持续释放bFGF，且具有良好的稳定性。

本发明涉及一种制备微球的方法，包括以下步骤：

提供有机相，所述有机相包含溶解于有机溶剂中的聚己内酯(PCL)和任选的有机相表面活性剂；