[发明专利]一种提高水飞蓟蛋白酶解物抗氧化活性的方法

说明书

本发明属于抗氧化产物制备技术领域，具体涉及一种提高水飞蓟蛋白酶解物抗氧化活性的方法；包括如下步骤：以水飞蓟蛋白为原料，经过酶解、离心分离、真空浓缩、干燥，制得水飞蓟蛋白酶解物；再将木糖与水飞蓟蛋白酶解物进行糖基化反应，经过离心、冷冻干燥等工艺过程，制得糖基化反应产物。本发明制备工艺简单、能耗低、制备周期短，通过该工艺制得的水飞蓟蛋白酶解物具有较高的抗氧化活性，可以直接作为天然营养品食用，也可以将其作为食品添加剂添加于其它食品中，具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明属于抗氧化产物制备技术领域，具体涉及一种提高水飞蓟蛋白酶解物抗氧化活性的方法。

背景技术

自由基是生物体新陈代谢过程中产生的物质，其化学性质十分活跃并且具有高度的强氧化性，体内过量自由基的存在会引起细胞和组织结构的破坏，造成机体功能损伤，是引起多种疾病的重要原因。高活性抗氧化剂的摄入是清除体内过量自由基的一种有效方法。目前，在食品工业中，由于人工合成抗氧化剂存在明显的毒副作用和安全性问题，在使用上受到一定的限制，因此寻找高抗氧化活性的天然成分已成为功能食品领域的研究热点。

糖基化反应是食品中的糖与氨基酸、肽、蛋白质之间在热处理和存储过程中自动发生的一种非酶褐变反应。糖基化反应产物普遍存在于各种食品体系中，对食品的色泽、风味、稳定性和营养价值等具有很大的影响。研究发现，糖基化反应改性技术可改善蛋白酶解物的抗氧化活性，与化学法和酶法改性相比，不需要化学试剂，安全性高，是获得天然、安全、高效抗氧化剂的最佳途径。

水飞蓟为菊科药用草本植物，主要用来提取其药用有效成分水飞蓟素，而水飞蓟蛋白作为提取水飞蓟素的副产物，并没有得到很好的开发利用。本发明以水飞蓟蛋白酶解物为氨基供体，与木糖进行糖基化反应，制备出具有高抗氧化活性的水飞蓟蛋白酶解物。本研究一方面可以提高水飞蓟籽的综合加工利用，另一方面制备的天然抗氧化剂在食品工业中具有广阔的市场应用前景。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供的是一种提高水飞蓟蛋白酶解物抗氧化活性的方法。

为了实现本发明的目的，本发明的具体步骤如下：

(1)水飞蓟蛋白酶解物的制备：称取一定量的水飞蓟蛋白，用去离子水配制成质量分数为2％的溶液，调节pH值至7.0，置于55℃恒温水浴中，添加中性蛋白酶进行水解，其中，中性蛋白酶与水飞蓟蛋白的质量比为3:100；在整个水解过程中用电动搅拌机不断搅拌，并不断加入0.5mol/L NaOH溶液保持反应体系的pH值恒定在7.0，反应2小时后，将酶解液在沸水浴中保温灭酶20min中止反应；然后将酶解物在4000r/min离心30min，取上清液经浓缩后、冷冻干燥即得蛋白酶解物；

(2)水飞蓟蛋白酶解物糖基化反应产物的制备：将步骤(1)所得的水飞蓟蛋白酶解物和木糖分别加入水溶液中，得到水飞蓟蛋白酶解物水溶液和木糖水溶液；然后再将水飞蓟蛋白酶解物水溶液和木糖水溶液混合，得到混合液；调节混合液的pH值和温度，反应一段时间后，得到糖基化反应液，将糖基化反应液冷却至室温，再经过离心浓缩后、冷冻干燥即得木糖与水飞蓟蛋白酶解物的糖基化反应产物。

优选的，步骤(2)中，所述的水飞蓟蛋白酶解物水溶液和木糖水溶液的质量分数均为2％。

优选的，步骤(2)中，所述的水飞蓟蛋白酶解物水溶液和木糖水溶液的体积比为(2～1):(1～2)。

优选的，步骤(2)中，所述调节混合液的pH值为8～12。

优选的，步骤(2)中，所述调节混合液的温度为50～90℃。

优选的，步骤(2)中，所述的反应一段时间为30～120min。

优选的，步骤(2)中，所述的离心的转速为4000r/min，离心时间为30min。

本发明的有益效果在于：