[发明专利]一种用于检测人类氨基糖苷类抗生素敏感基因的试剂盒

说明书

本发明公开了一种用于检测人类氨基糖苷类抗生素敏感基因的试剂盒，包括MT‑RNR1‑1引物组，MT‑RNR1‑2引物组，MT‑RNR1‑3引物组；本发明以人类氨基糖苷类抗生素用药敏感基因MT‑RNR1为检测对象，通过特异引物的组合，结合核酸质谱检测技术，从而实现快速，简单，准确的检测相关基因的变异情况。

技术领域

本发明涉及一种用于检测人类氨基糖苷类抗生素敏感基因的试剂盒，属于生物医药技术领域。

背景技术

药物基因组学研究表明，氨基糖苷类抗生素的药物代谢与人类基因组中的线粒体基因MT-RNR1密切相关；MT-RNR1变异的个体，在用药过程中，引发的听力下降甚至耳聋，肾毒性等副作用与常人差异显著；因此，在使用该类药物之前，先检测相关基因的变异情况，对患者有重要的指导意义。

目前市场上氨基糖苷类抗生素代谢基因测定技术多采用荧光PCR等技术来进行的；检测通量较小，检测成本较高。

本发明旨在通过单碱基延伸的核酸质谱技术，对人类糖尿病用药敏感基因进行变异检查，从而为个体临床用药提供安全指导。

发明内容

针对上述存在的技术问题，本发明的目的是：提出了一种更加精确以及高效的用于人类氨基糖苷类抗生素用药敏感基因突变位点的核酸质谱检测试剂盒。

本发明的技术解决方案是这样实现的：一种用于检测人类氨基糖苷类抗生素敏感基因的试剂盒，其特征在于：包含MT-RNR1-1引物组，MT-RNR1-2引物组，MT-RNR1-3引物组；其中，

MT-RNR1-1引物组由正向引物RNR1F1，反向引物RNR1R1，以及单碱基延伸引物RNR1SP1组成；

MT-RNR1-2引物组由正向引物RNR1F2，反向引物RNR1R2，以及单碱基延伸引物RNR1SP2组成；

MT-RNR1-3引物组由正向引物RNR1F3，反向引物RNR1R3，以及单碱基延伸引物RNR1SP3组成；

该核酸质谱检测试剂盒的每一反应体系的组成如下：

第一步，多重PCR反应：

引物组a，包括引物RNR1F1，RNR1R1，RNR1F2，RNR1R2，RNR1F3，RNR1R3；

PCR master Mix；

H20；

DNA模板；

第二步：单碱基延伸反应：

上述PCR反应液；

iPLEX延伸混液；

引物组b，包括引物RNR1SP1，RNR1SP2，RNR1SP3；

H2O。

优选的，所述正向引物RNR1F1、反向引物RNR1R1、单碱基延伸引物RNR1SP1，依次包括如：SEQ ID Nos：1、SEQ ID Nos：2、SEQ ID Nos：71所示的序列。

优选的，所述正向引物RNR1F2、反向引物RNR1R2、单碱基延伸引物RNR1SP2，依次包括如：SEQ ID Nos：3、SEQ ID Nos：4、SEQ ID Nos：73所示的序列。

优选的，所述正向引物RNR1F3、反向引物RNR1R3、单碱基延伸引物RNR1SP3，依次包括如：SEQ ID Nos：5、SEQ ID Nos：6、SEQ ID Nos：75所示的序列。

由于上述技术方案的运用，本发明与现有技术相比具有下列优点：