[发明专利]一种烃氧化菌培养基、培养管及培养管制备方法

说明书

本发明提供了一种烃氧化菌培养基、培养管及培养管制备方法，该培养基的pH为6.8‑7.2，其包含硝酸铵、氯化镁、硫酸亚铁、氯化钙、硫酸钾、磷酸钠、氯化钠、乙二胺四乙酸、微量元素化合物、碳源、刃天青和去离子水；其中，所述微量元素包含锰、锌、铜、硒和硼，所述碳源包含乙醇、正丙醇和正丁醇。本发明的培养基组分过多次优化而确定，适合于烃氧化菌的繁殖发育，所培养出的微生物只是烃氧化菌，不会受到其他细菌的干扰，进而能够满足油气微生物勘探工程上大批样品的检测需求，在较短周期可提供准确的检测数据。

技术领域

本发明涉及油气微生物检测技术领域，特别地涉及一种烃氧化菌培养基、培养管及培养管制备方法。

背景技术

在深层油气藏压力的驱动下，油气藏中的轻烃组分持续向地表作垂直扩散和运移，被近地表土壤中的微生物所利用，定向改变油气藏上方地表土壤中的微生物数量和群落结构，与非油气藏上方近地表土壤微生物数量相比，形成以土壤轻烃为碳源的油气指示微生物数量上的异常，通过检测勘探区块地表土壤中油气微生物数量异常可预测下伏油气藏的分布。

微生物勘探中烃氧化菌的培养检测所涉及的培养基组分各科研单位不尽相同，需要结合烃氧化菌生理生化特征提供一种特异性较强的培养基，以此来提高检测的准确性。目前烃氧化菌的培养所使用的碳源一般为轻烃气体，轻烃气体充入试管内会产生压力，容易在培养过程中发生漏气，而且烃类气体易燃易爆，在操作过程中存在安全隐患。此外，目前所采用的实验流程较复杂，在操作过程中容易染菌，给培养结果带来一定的误差。因此，因此迫切需要研制出一种简单、准确、针对性强的烃氧化菌测试新工具和新方法，以此满足工程上油气微生物勘探的实际产生需求。

发明内容

针对上述现有技术中的问题，本申请提出了一种烃氧化菌培养基、培养管及培养管制备方法，该培养基的组分是经过多次优化而确定的，适合于烃氧化菌的繁殖发育，所培养出的微生物只是烃氧化菌，不会受到其他细菌的干扰。

第一方面，本发明提供了一种烃氧化菌培养基，其pH为6.8-7.2，其包含硝酸铵、氯化镁、硫酸亚铁、氯化钙、硫酸钾、磷酸钠、氯化钠、乙二胺四乙酸、微量元素化合物、碳源、刃天青和去离子水；其中，所述微量元素包含锰、锌、铜、硒和硼，所述碳源包含乙醇、正丙醇和正丁醇。

在一个实施方式中，以所述培养基的体积为基准，所述培养基的组分为：硝酸铵2.0g/L、氯化镁1.0g/L、硫酸亚铁0.2g/L、氯化钙0.3g/L、硫酸钾0.5g/L、磷酸钠1.0g/L、氯化钠2.0g/L、乙二胺四乙酸0.2g/L、微量元素化合物溶液5mL/L、乙醇2mL/L、正丙醇2mL/L、正丁醇2mL/L、刃天青溶液5mL/L以及余量的去离子水；

其中，以溶液体积为基准，所述微量元素化合物溶液的组分为：氯化锰0.5mg/L、氯化锌1.5mg/L、硫酸铜2.0mg/L、硒酸钠1.0mg/L、硼酸1.5mg/L以及余量的去离子水。

在一个实施方式中，所述刃天青溶液的浓度为0.1％。

第二方面，本发明提供了一种烃氧化菌培养管，其包括上述第一方面所述的培养基。

在一个实施方式中，培养管还包括：

玻璃试管，其用于盛装所述培养基，所述玻璃试管的口部设置有外螺纹；

橡胶塞，其能够装配至所述培养管主体的口部；

旋盖，其内壁上设置有与所述外螺纹配合的内螺纹，所述旋盖的顶部还开设有开口。

在一个实施方式中，所述玻璃试管为高硼硅玻璃试管。

在一个实施方式中，所述橡胶塞为丁基橡胶塞。

在一个实施方式中，所述旋盖为聚丙烯螺旋盖

第二方面，本发明提供了一种烃氧化菌培养管的制备方法，其用应用上述第二方面所述的烃氧化菌培养管，所述制备方法包括：