[发明专利]一种测定粮谷中咪鲜胺及其代谢物残留量的方法及应用

说明书

本发明提供了一种测定粮谷中咪鲜胺及其代谢物残留量检测的方法，本发明中利用气相色谱‑三重四级杆质谱仪来测试，具体包括配制基质混合标准系列工作溶液、提取样品、净化样品溶液、样品上机检测。本发明中考察了提取溶剂的种类、分散固相萃取剂的种类用量选择等因素对提取效率的影响，并对气相色谱条件和三重四级杆质谱仪进行条件优化。本发明操作简便高效，试剂消耗较少，能快速应对高通量样品处理的要求，同时在精密度、准确性、灵敏度上都能满足农药残留检测要求，适用于含油脂的粮谷中咪鲜胺及其代谢物残留量的检测。

技术领域

本发明属于分析测试领域，具体涉及一种测定粮谷中咪鲜胺及其代谢物残留量的方法及应用。

背景技术

咪鲜胺是一种广谱杀菌剂，可用于防治禾谷类作物茎、叶、穗上的许多病害，如水稻稻瘟病及白粉病、叶斑病等。咪鲜胺在环境中会先降解成N-丙基-N-[2-(2,4,6-三氯苯氧基)乙基]脲和N-醛基-N[2-(2,4,6,-三氯苯氧基)乙基]脲,最后降解成2,4,6-三氯苯酚，见图1。咪鲜胺属于低毒性杀菌剂，但其最终代谢产物可能会对环境以及人类产生长期不良影响，因此在检测咪鲜胺时同时检测2,4,6-三氯苯酚是非常有必要的。咪鲜胺降解过程如下：

目前主要是通过气相色谱法(GC-ECD)、液相色谱法(HPLC)、气相色谱-质谱法(GC-MS)、气相色谱-串联质谱法(GC-MS/MS)、液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)来检测咪鲜胺及其代谢物的残留。气相色谱法(GC-ECD)(韩丽君等,咪鲜胺及其代谢物在水稻中的残留检测方法及残留动态[J].农药学学报,2005,7(1):54-58)由于前处理极其复杂繁琐、无法定性、实验过程中还需要使用到对眼睛、呼吸系统和皮肤都有刺激性的吡啶盐酸盐，整个实验过程时间较长，不利于实验室对于高通量样品的快速处理，且该方法并不适用于粮谷基质。液相色谱法(HPLC)(柳训才等,固相萃取-高效液相色谱法测定蘑菇中咪鲜胺的残留量[J].分析科学学报,2008,24(6):735-737)、气相色谱-质谱法(GC-MS)(张世瑞等,两种热带水果中咪鲜胺残留的气质联用测定[J].现代农药,2010,09(4):32-34)、液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)(赵成林等,超高效液相色谱—串联质谱法测定蒜薹中的咪鲜胺残留[J].农药科学与管理,2019,40(7):36-41)这三种方法中大部分只是检测了咪鲜胺的含量并未检测其代谢物2,4,6-三氯苯酚的含量、灵敏度比较低且也未涉及粮谷中的残留量检测，气相色谱-串联质谱法(GC-MS-MS)(董素静等,气相色谱/三重四级杆质谱法同时测定蔬菜水果中13种农药残留[J].现代农业科技,2017,(5):108-110)目前也只是实际应用在基质比较简单的水果蔬菜等一般性植物源性食品中。粮谷类基质比较复杂，除维生素、食物纤维外，还存在着大量蛋白质、脂肪以及多种氨基酸等物质的干扰，基质效应极强。目前，对于食品中咪鲜胺及其代谢物的残留量检测，不能有效去除脂肪、蛋白质等物质干扰。因此，建立用气相色谱-三重四级杆质谱仪来同时检测含油脂的粮谷中咪鲜胺及其代谢物2,4,6-三氯苯酚的残留量的方法非常有必要。

发明内容

为解决现有的技术问题，本发明提供一种利用气相色谱-三重四级杆质谱仪测定含油脂的粮谷中咪鲜胺及其代谢物残留量检测的方法，选用水及乙酸乙腈溶剂在缓冲盐体系中充分提取粮谷中咪鲜胺及其代谢物，并采用吸附剂和净化剂对提取液进行净化，通过气相色谱-三重四级杆质谱仪进行有效分离和定性，并用基质混合标准曲线法进行准确定量。

本发明的目的之一在于提供一种测定粮谷中咪鲜胺及其代谢物残留量的方法，包括样品基质溶液配制、样品提取与净化、检测样品，其中，所述的咪鲜胺代谢物选自N-丙基-N-[2-(2,4,6-三氯苯氧基)乙基]脲、N-醛基-N[2-(2,4,6,-三氯苯氧基)乙基]脲、2,4,6-三氯苯酚中的至少一种。

上述测定粮谷中咪鲜胺及其代谢物残留量的方法，具体包括以下步骤：

(1)样品提取：将水加入到称好的样品粉末中混匀后，加入有机溶剂、钠盐混匀，离心、静置得到上清液；