[发明专利]一种细胞内小分子代谢物的鉴定方法在审
| 申请号： | 201711251029.7 | 申请日： | 2017-12-01 |
| 公开（公告）号： | CN109870498A | 公开（公告）日： | 2019-06-11 |
| 发明（设计）人： | 罗云;张保琴;耿柠波;王菲迪;任晓倩;张海军;陈吉平 | 申请（专利权）人： | 中国科学院大连化学物理研究所 |
| 主分类号： | G01N27/62 | 分类号： | G01N27/62 |
| 代理公司： | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人： | 马驰 |
| 地址： | 116023 *** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种细胞内小分子代谢物的鉴定方法。根据精确质量数及色谱图匹配对代谢物进行定性，根据谱图的丰度对代谢物进行相对定量。该分析方法流程如下：将培养的贴壁细胞用PBS快速清洗后使用液氮淬灭；然后加入萃取液提取细胞内的全部代谢物；检索KEGG与METLIN数据库获得代谢通路主要代谢物的离子对与碰撞能等参数，建立小分子代谢物的检测分析方法；采用串联四级杆线性离子阱高性能质谱(Q‑Trap)结合四级杆‑飞行时间质谱(Q‑TOF)对细胞内的代谢物进行定性定量分析。本发明可以用于细胞样品中代谢产物的定性定量分析该方法检测鉴定到的代谢物的范围更广，代谢物的线性范围更宽，有效解决了目前分析代谢物定性难且需要大量的标准品作对照的问题。 | ||
| 搜索关键词： | 代谢物 小分子代谢物 定性 细胞 定量分析 四级杆 飞行时间质谱 质量数 线性离子阱 萃取液提取 代谢产物 代谢通路 检测分析 快速清洗 贴壁细胞 细胞样品 相对定量 有效解决 标准品 匹配对 色谱图 淬灭 丰度 液氮 质谱 串联 离子 数据库 检索 分析 检测 | ||
【主权项】：
1.一种细胞内小分子代谢物的串联四级杆线性离子阱高性能质谱分析方法，其特征在于：使用METLIN数据库中Q‑TOF的MS/MS色谱图信息匹对用于定性；使用串联四级杆线性离子阱高性能质谱用于定量；包括以下步骤：a)细胞的淬灭：将贴壁细胞用PBS缓冲液清洗后液氮淬灭，抑制细胞内的酶活性，减少代谢物的酶代谢；b)细胞代谢物的提取：低温状态下加入冷的甲醇/水提取液，于冰水浴中超声提取、涡旋，萃取液离心冷冻，待分析；c)串联四级杆线性离子阱高性能质谱分析方法：根据结构信息，选择正离子或负离子检测模式，利用METLIN的MS/MS质谱图信息(包括子离子及母离子质量数、丰度、碰撞能)建立串联四级杆线性离子阱高性能质谱分析方法；串联四级杆线性离子阱高性能质谱MRM检测模式获得XIC谱图，结合代谢物的脂水分配系数以及Q‑TOF的target MS/MS模式确定各离子对色谱峰的准确保留时间；d)使用串联四级杆线性离子阱高性能质谱对代谢物进行定量分析。
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- 本实用新型涉及一种离子迁移谱报警器，包含：壳体、气路模块、净化组件、检测模块、信号处理模块，其中：壳体侧壁分别设有进风口、出风口，进风口与气路模块的输入端连通，气路模块的输出端与净化组件的输入端连通，净化组件的输出端与检测模块的输入端连通，检测模块的输出端与信号处理模块的输入端连通，信号处理模块的输出端与出风口连通，对应净化组件的壳体一侧壁设有开口，开口外侧罩设有开合板，开合板靠近卡接槽的一侧面设有与卡接槽配合的开合板滑凸，开合板的一端设置有卡扣，靠近开合板的壳体的一侧设置有旋转轴，旋转轴的外侧套设有与其转动连接的固定转板。本实用新型解决了现有离子迁移谱报警器拆装以及维修不便的问题。
- 一种高分辨飞行时间质谱仪准原位反应监测系统-201910730934.3
- 胡霄雪;沈志强;杨培菊;黄晓卷;牛建中 - 中国科学院兰州化学物理研究所
- 2019-08-08 - 2019-10-22 - G01N27/62
- 本发明公开了一种高分辨飞行时间质谱仪准原位反应监测系统，包括高分辨飞行时间质谱仪、原位反应装置和自动分流稀释传输装置；其中原位反应装置包括反应器、两个注射泵、加热磁力搅拌器，且两个注射泵与反应器通过PEEK管相连；自动分流稀释传输装置包括恒流泵、截止阀、六通阀和分流器，且截止阀、恒流泵和分流器分别通过PEEK管与六通阀相连。本发明将原位反应器中的待测反应液在不接触空气的条件下快速分流稀释传输至质谱仪，完成化学反应的准原位反应监测，彻底解决高分辨飞行时间质谱仪化学常规检测方式下不易检测到化学反应中间体和不稳定中间产物的问题，扩展了高分辨飞行时间质谱仪在反应机理研究方面的功能。
- 一种黄潮土中重金属有效态的提取方法-201910597774.X
- 马丽;成永霞;赵勇;任战红;袁远;牛存洋 - 河南农业大学
- 2019-07-03 - 2019-10-18 - G01N27/62
- 本发明提供了一种黄潮土中重金属有效态的提取方法，所述方法包括以下步骤：(1)将提取剂和土壤混合分散均匀，得到提取体系；其中，所述提取剂为Na2EDTA和氢氧化钠的混合水溶液，混合水溶液中Na2EDTA的浓度为0.05‑0.2mol/L，混合水溶液的pH为6‑8；(2)对提取体系进行涡旋或者震荡提取；(3)固液分离，收集提取液。本发明的提取方法能够更有效地提取黄潮土中的重金属有效态，提取得到的提取液中的重金属有效态的提取率高，提取的准确性、稳定性好，且方法简单，并且所选择的提取剂和提取剂的参数能较好地避免非有效态重金属被提取到提取液中，可以较好地避免非有效态重金属在评价土壤中的重金属污染风险的影响。
- 一种基于气体分析质谱及近红外光谱分析烟叶霉变的方法-201910604251.3
- 黄健文 - 云南腾辉科技开发有限公司
- 2019-07-05 - 2019-10-18 - G01N27/62
- 本发明提供一种基于气体分析质谱及近红外光谱分析烟叶霉变的方法，包含以下步骤：步骤1、代表性样品的分类；步骤2、采用VOC质谱分析及特征离子峰的确定；步骤3、进行近红外光谱分析并建立SIMCA类模型；步骤4、定量校正模型的建立；步骤5、定量校正模型的验证；步骤6、未知样品的判定。本发明的一种基于气体分析质谱及近红外光谱分析烟叶霉变的方法，利用气体质谱分析仪与近红外光谱仪，通过直观、定性和定量分析相结合，对正常烟叶和霉变烟叶的差异特征进行研究，实现正常烟叶与霉变烟叶的快速判别及含量预测，为霉变烟叶的快速、有效识别提供一种新的方法，为霉变烟叶的快速防止处理奠定基础。
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