[发明专利]用于宫颈高级别病变和宫颈癌早期检测的组合物及试剂盒

权利要求书

1.一组检测组合物在制备宫颈高级别病变检测试剂中的应用，其特征在于，所述检测组合物包括检测引物、探针和封闭引物，其中，

所述检测引物由FAM19A4基因甲基化引物、JAM3基因甲基化引物和PAX1基因甲基化引物和1对内参基因GAPDH引物组成，引物序列如下：

FAM19A4基因甲基化正向引物F：SEQ ID NO.1，

FAM19A4基因甲基化反向引物R：SEQ ID NO.2；

JAM3基因甲基化正向引物F：SEQ ID NO.3，

JAM3基因甲基化反向引物R：SEQ ID NO.4；

PAX1基因甲基化正向引物F：SEQ ID NO.5，

PAX1基因甲基化反向引物R：SEQ ID NO.6；

内参基因GAPDH正向引物F：SEQ ID NO.7，

内参基因GAPDH反向引物R：SEQ ID NO.8；

所述探针由FAM19A4基因的甲基化位点对应的Taqman探针、JAM3基因的甲基化位点对应的Taqman探针、PAX1基因的甲基化位点对应的Taqman探针和内参基因GAPDH对应的Taqman探针组成，探针序列如下：

FAM19A4基因探针：FAM-SEQ ID NO.9-BHQ1；

JAM3基因探针：ROX-SEQ ID NO.10-BHQ2；

PAX1基因探针：CY5-SEQ ID NO.11-BHQ2；

内参基因GAPDH探针：VIC-SEQ ID NO.12-BHQ1；

所述封闭引物由FAM19A4基因甲基化封闭引物、JAM3基因甲基化封闭引物和PAX1基因甲基化封闭引物组成，封闭引物序列如下：

FAM19A4基因甲基化封闭引物1：SEQ ID NO.13-C3spacer；

FAM19A4基因甲基化封闭引物2：SEQ ID NO.14-C3spacer；

JAM3基因甲基化封闭引物1：SEQ ID NO.15-C3spacer；

JAM3基因甲基化封闭引物2：SEQ ID NO.16-C3spacer；

PAX1基因甲基化封闭引物1：SEQ ID NO.17-C3spacer；

PAX1基因甲基化封闭引物2：SEQ ID NO.18-C3spacer。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述检测组合物还包括阳性质控品和阴性质控品。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述检测组合物还包括PCR反应液，所述PCR反应液包括Taq DNA聚合酶、dNTPs、Mg²⁺和10×DNA聚合酶buffer。