[发明专利]一种高纯度20(S)-原人参二醇及其制备方法

说明书

本发明属于医药领域，具体涉及一种高纯度20(S)‑原人参二醇及其制备方法，所述高纯度20(S)‑原人参二醇，其制备方法采用20(S)‑原人参二醇粗提物以乳浊液的形式上大孔吸附树脂柱层析，然后通过逐步降低结晶母液中乙醇浓度至30～40％的方式增大20(S)‑原人参二醇晶体的生成量并提高纯度。按本发明提供的高纯度20(S)‑原人参二醇，其制备方法批处理量大，收率高，且工艺简单，所用试剂环境友好，易于产业化。

技术领域

本发明属于医药领域，具体涉及一种高纯度20(S)-原人参二醇及其制备方法。

背景技术

20(S)-原人参二醇，英文名称20(S)-Protopanaxdiol(简称：20(S)-PPD)，其分子式为 C₃₀H₅₂O₃，其结构如下，在人参、三七、西洋参、绞股蓝等药用植物中均有发现。

现代研究发现，20(S)-PPD具有抑制多种癌细胞生长、抗抑郁等诸多药理活性，是一个具有良好临床应用前景的化合物。

20(S)-PPD虽然存在于人参、三七、西洋参等多种药用植物中，但是含量均较低，制备困难。目前大多以人参皂苷Rc、Rb1、Rb2、三七总皂苷、绞股蓝总皂苷等为起始材料，采用酸水解、碱水解、酶水解、微生物转化、微波转化等技术获取20(S)-PPD。

限于纯化手段，目前工业化工艺制备的20(S)-PPD，纯度在50％左右。要获得更高纯度的20(S)-PPD，则需要借助以硅胶、凝胶、反相硅胶等为分离介质的制备色谱技术，设备投入大，批处理能力低、生产成本高，所用试剂对环境污染大，这些因素均极大地限制了20(S)-PPD 的应用。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供一种高纯度20(S)-PPD及其制备方法，本发明提供的高纯度20(S)-PPD，20(S)-原人参二醇纯度可达95％以上，其按本发明提供的方法制备，该方法具有批处理能力大、所用试剂材料环境友好等特点。

本发明提供一种高纯度20(S)-PPD，其由以下制备方法制备，其技术方案包括以下步骤：

①乳浊液上样以增大批处理量：20(S)-PPD粗提物以一定浓度的乙醇为溶剂，制成乳浊液，按一定的20(S)-原人参二醇：树脂体积比例上大孔吸附树脂层析柱。

制备20(S)-PPD粗提物乳浊液的乙醇浓度为40～60％，优选为45～55％。

所述20(S)-原人参二醇：树脂体积比例为20～50mg 20(S)-PPD/mL大孔吸附树脂，优选为 25～35mg 20(S)-PPD/mL大孔吸附树脂。

所用大孔吸附树脂包括但不限于非极性的D-101、HPD-100、HP-20、HJ-08，弱极性的 AB-8、HJ-06等，以及中等极性的HJ-10、ADS-10等，优选为非极性的D-101和弱极性的AB-8。

②梯度洗脱以富集并纯化20(S)-PPD：上样结束后，依次用50％乙醇淋洗5～7个柱体积、用60％乙醇洗脱3～10个柱体积、用70％乙醇洗脱5～10个柱体积。收集富含 20(S)-PPD的70％乙醇洗脱部位，并对大孔树脂层析柱进行再生。

③持续维持过饱和状态以增大结晶收率：将富含20(S)-PPD的70％乙醇洗脱部位减压脱醇至乳白色，静置，有20(S)-PPD粗晶析出。

每当母液澄清时，即加水至母液稍显乳白，以降低母液中乙醇浓度，从而降低了20(S)-PPD 的溶解度，使20(S)-PPD在母液中持续保持过饱和状态以增大晶体收率。重复该操作至母液乙醇浓度至特定值，并当母液重新澄清后，继续室温静置24小时，过滤收集结晶，并以适当浓度的乙醇溶液洗涤滤饼，干燥，即得纯度大于95％的20(S)-PPD。