[发明专利]一种发酵生产灰黄霉素的培养基

说明书

本发明公开了一种发酵生产灰黄霉素的培养基，该发酵生产灰黄霉素的培养基包括种子培养基、发酵培养基和补料培养基，本发明是一种能够缩短发酵周期、提高效价、生产成本低廉的发酵生产灰黄霉素的新型培养基。本发明在培养基配方的物料比例上做出改变，调整碳酸钙和磷酸二氢钾的比例，首次采取加入一定比例甜菜碱的方法，来提高产品效价和缩短灰黄霉素的发酵周期。其优点有以下几点：甜菜碱具有发泡增稠的作用，可以放大发酵的效果，缩短发酵周期，同时其中含有的氮元素也可以作为氮源。通过调整碳酸钙、磷酸二氢钾和甜菜碱的比例，来控制培养基中的碳氮比例，实现最优的比例，从而使菌株能够更好的生长，提高效价。

技术领域

本发明属于微生物发酵工程技术领域，具体的说是涉及一种发酵生产灰黄霉素的培养基。

背景技术

灰黄霉素(griseofulvin)是属于芳香族衍生物类的一种抗真菌抗生素，临床上主要用于头癣、严重体股癣、叠瓦癣、手足甲癣等，对头癣的疗效较明显。在农业上用于抗植物真菌病。国内灰黄霉素的发酵生产使用的产生菌均是由我国自行筛选的野生Penicillumpatulum4541菌株经过多代诱变及定向选育获得，本发明使用的菌种也是该菌株的后代。

十九世纪八十年代以来，灰黄霉素工业发酵生产一直使用南方盛产的籼米，加工成籼米粉(或称大米粉)作为主要碳源。然而用大米作为主要碳源生产灰黄霉素，存在着货源不充足、产品质量不稳定，生产成本高，发酵周期长等缺点。另外，现有技术中发酵生产灰黄霉素的培养基碳氮源比例未曾推陈出新，且配方中碳酸钙和磷酸二氢钾的比例变动不大，导致菌种菌丝致密性和孢子生长发育效果不是很理想。为了缩短灰黄霉素发酵周期和提高效价，有必要对灰黄霉素的培养基进行改进。

发明内容

本发明为了克服现有技术存在的不足，提供一种能够缩短发酵周期、提高效价、生产成本低廉的发酵生产灰黄霉素的新型培养基。

本发明是通过以下技术方案实现的：本发明公开了一种发酵生产灰黄霉素的培养基，发酵生产灰黄霉素的培养基包括种子培养基、发酵培养基和补料培养基；发酵培养基由下述重量比例的原料配制而成：大米粉13～17％、碳酸钙0.6～0.9％、磷酸二氢钾0.1～0.5％、氯化钠0.3～0.5％、氯化钾0.5～0.7％、硫酸镁0.07～0.14％、硫酸亚铁0.06～0.14％、硫酸铵0.06～0.14％、硝酸钠0.06～0.14％和甜菜碱0.1％～0.4％，余量为水，pH自然。

本发明种子培养基由下述重量比例的原料配制而成：大米粉8～12％、碳酸钙0.3～0.5％、磷酸二氢钾0.2～0.4％、氯化钠0.15～0. 25％、氯化钾0.15～0.25％、硫酸镁0.06～0.14％、硫酸亚铁0.06～0.14％、硫酸铵0.06～0.14％、硝酸钠0.06～0.14％和甜菜碱0.08％～0.2％，余量为水，pH自然。

本发明补料培养基由下述重量比例的原料配制而成：大米粉20～35％、淀粉酶0.03～0.1％和消泡剂0.05～0.25％，余量为水，pH自然。

本发明中发酵培养基、种子培养基和补料培养基的制备方法均是按照各培养基中各原料的比例称取原料，然后将称取后的各原料投入发酵罐中搅拌均匀，将发酵罐加盖密封灭菌制备。

作为优选，本发明发酵培养基由下述重量比例的原料配制而成：大米粉13％、碳酸钙0.6％、磷酸二氢钾0.4％、氯化钠0.35％、氯化钾0.56％、硫酸镁0.08％、硫酸亚铁0.09％、硫酸铵0.07％、硝酸钠0.08％和甜菜碱0.1％，余量为水。

作为优选，本发明种子培养基由下述重量比例的原料配制而成：大米粉9％、碳酸钙0.5％、磷酸二氢钾0.35％、氯化钠0.16％、氯化钾0.17％、硫酸镁0.08％、硫酸亚铁0.07％、硫酸铵0.09％、硝酸钠0.08％和甜菜碱0.2％，余量为水。

作为优选，本发明补料培养基由下述重量比例的原料配制而成：大米粉25％、淀粉酶0.03％和消泡剂0.2％，余量为水。