[发明专利]一种肠道嗜酸乳杆菌的检测方法和试剂

权利要求书

1.一种非诊断治疗目的的肠道嗜酸乳杆菌的检测方法，其特征在于：包括获取待测对象的粪便样品，提取所述粪便样品的核酸样本，采用嗜酸乳杆菌特异性的PCR扩增检测所述核酸样本，通过检测粪便样品中的嗜酸乳杆菌表征肠道嗜酸乳杆菌。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述嗜酸乳杆菌特异性的PCR扩增，具体采用的是染料法实时荧光定量PCR扩增，扩增引物的上游引物为Seq ID No.1所示序列，下游引物为Seq ID No.2所示序列；

Seq ID No.1：5’-ACTGCTGCTGGTGTTCGTGGTA-3’

Seq ID No.2：5’-TGACGCAGGTGTCCTCTTACCA-3’。

3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于：还包括对所述染料法实时荧光定量PCR扩增的结果进行融解曲线分析，融解曲线出峰单一则判断检测结果特异性强，出峰不单一则判断检测结果存在非特异性扩增或引物二聚体。

4.根据权利要求1-3任一项所述的检测方法，其特征在于：还包括对所述PCR扩增的产物进行测序，根据测序结果判断是否为嗜酸乳杆菌。

5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于：对所述PCR扩增的产物进行测序，具体包括将PCR扩增的产物与载体连接，然后对重组载体进行测序。

6.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于：所述载体为T载体。

7.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于：所述根据测序结果判断是否为嗜酸乳杆菌，具体包括将测序结果用NCBI进行BLAST比对，根据比对结果判断是否为嗜酸乳杆菌。

8.一种肠道嗜酸乳杆菌的检测试剂，其特征在于：包括上游引物和下游引物，所述上游引物为Seq ID No.1所示序列，所述下游引物为Seq ID No.2所示序列。

9.根据权利要求8所述的检测试剂，其特征在于：还包括用于染料法实时荧光定量PCR扩增的试剂。

10.根据权利要求9所述的检测试剂，其特征在于：所述用于染料法实时荧光定量PCR扩增的试剂包括TB GreenPremix Ex Taq反应液和ROX参比染料。